पाइप रखरखाव 

पॉलिमर की जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी। विशेष कार्यशाला का कार्य

इस विधि का भौतिक आधार अत्यंत सरल एवं स्पष्ट है। अध्ययन के तहत बहुलक समाधान एक झरझरा शर्बत से भरे स्तंभ के माध्यम से बहता है। घटकों के मिश्रण का पृथक्करण मोबाइल (प्रवाहित विलायक) और स्थिर (शर्बत के छिद्रों में विलायक) चरणों के बीच पदार्थ के वितरण पर आधारित होता है, अर्थात, जेल कणिकाओं के छिद्रों में प्रवेश करने के लिए बहुलक मैक्रोमोलेक्यूल्स की विभिन्न क्षमता पर आधारित होता है। , यहीं से विधि का नाम आता है।

शर्बत कणिकाओं की सतह कई चैनलों, गड्ढों और अन्य अनियमितताओं से ढकी होती है, जिन्हें पारंपरिक रूप से छिद्र कहा जाता है, जिनकी कुल मात्रा होती है वी„. विलायक के लिए अप्राप्य आयतन को मृत आयतन कहा जाता है। किसी घोल को ऐसी सतह से बहने दें, जिसके आयाम छिद्रों के आयामों के अनुरूप हों या उनसे छोटे हों। इनमें से कुछ अणु छिद्रों में प्रवेश करते हैं यदि गतिमान चरण में उनकी सांद्रता छिद्रों की तुलना में अधिक होती है। जब विलेय क्षेत्र शर्बत के दिए गए क्षेत्र को छोड़ देता है, तो जेल के छिद्रों के अंदर अणुओं की सांद्रता बाहर की तुलना में अधिक हो जाती है, और अणु फिर से मोबाइल चरण के प्रवाह में फैल जाते हैं। यदि अणुओं का आकार छिद्रों के आकार से बड़ा है, तो ऐसा अणु जेल ग्रेन्युल से बिना रुके गुजरता है, यानी, इसे छिद्र स्थान से बाहर रखा जाता है। इस प्रकार, बड़े मैक्रोमोलेक्यूल्स स्तंभ के माध्यम से तेजी से प्रवाहित होते हैं। इसका मतलब यह है कि पॉलीडिस्पर्स नमूने के विभिन्न अणु अलग-अलग समय पर अलग-अलग अवधारण मात्रा के साथ कॉलम से बाहर निकलेंगे। वी.आर

वी.आर= वी0 +केवीवी„ >

कहाँ वो- मोबाइल चरण की मात्रा (वर्तमान विलायक); के। वी- छिद्र मात्रा वितरण गुणांक: बड़े मैक्रोमोलेक्यूल्स के लिए जिन्हें छिद्रों से पूरी तरह से बाहर रखा गया है केवी = 0; विलायक अणुओं के लिए kv= 1),

मान वीआर यह मुख्यतः तापमान, विलायक की प्रकृति और घोल की सांद्रता पर निर्भर करता है।

यदि इसकी गिब्स ऊर्जा निर्धारित की जाती है तो समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल के व्यवहार को आसानी से विस्तार से वर्णित किया जा सकता है ए.जी.. यदि कोई मैक्रोमोलेक्यूल किसी छिद्र में प्रवेश करता है, तो उसकी एन्ट्रापी कम हो जाती है। मैक्रोमोलेक्यूल के खंडों और छिद्र की दीवारों के बीच परस्पर क्रिया की उपस्थिति में, एन्थैल्पी में परिवर्तन होता है: आकर्षण के साथ, एन्थैल्पी कम हो जाती है, और इसके विपरीत। इसलिए, सोखना की अनुपस्थिति में ए.जी. > 0, छिद्र की दीवारों पर मैक्रोमोलेक्यूल्स के मजबूत सोखने के साथ ए.जी. < 0. तदनुसार, पहले मामले में, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी (आकार वितरण) होता है, और दूसरे में - सोखना; पर स्थितियाँ ए.जी.=0 क्रिटिकल कहलाते हैं. चूंकि क्षेत्र में ए.जी. > 0, मैक्रोमोलेक्यूल्स को आकार के आधार पर अलग किया जाता है, और रैखिक पॉलिमर के आणविक भार द्वारा विश्लेषण संभव है। यदि पॉलिमर शाखाबद्ध है, तो पृथक्करण प्रक्रिया अधिक जटिल हो जाती है और शाखाओं के प्रकार और संख्या पर निर्भर करती है, और कॉपोलिमर के मामले में, श्रृंखला की संरचना और रुकावट पर भी निर्भर करती है।

सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले सॉर्बेंट हाइड्रोफोबिक सामग्रियों के जैल हैं, उदाहरण के लिए डिवाइनिल-बेंजीन के साथ क्रॉस-लिंक्ड पॉलीस्टाइनिन: ऐसे जैल में विश्लेषण किए गए नमूनों का लगभग पूरी तरह से कोई सोखना प्रभाव नहीं होता है। हाल ही में, मैक्रोपोरस ग्लास व्यापक हो गए हैं, जिनमें पॉलिमर सॉर्बेंट्स की तुलना में कई फायदे (कण कठोरता, छिद्र आकार में भिन्नता, रासायनिक स्थिरता) और नुकसान (उन पर पॉलिमर की बढ़ी हुई सोखना) हैं।

सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले सॉल्वैंट्स टेट्राहाइड्रोफ्यूरान (टीएचएफ), क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि, साइक्लोहेक्सेन और उनके मिश्रण हैं। टीएचएफ को प्राथमिकता दी जाती है, जो टोल्यूनि के विपरीत, पॉलिमर मैक्रोमोलेक्यूल्स के साथ मिसेल या समुच्चय नहीं बनाता है और स्पेक्ट्रम के यूवी क्षेत्र में पारदर्शी है। इसके अलावा, THF का उपयोग करने वाली 11IX विधि की प्रभावशीलता काफी कम तापमान (35-45 डिग्री सेल्सियस) पर अधिकतम है। हालाँकि, दीर्घकालिक भंडारण के दौरान, THF विस्फोटक पेरोक्साइड यौगिकों को बनाने के लिए ऑक्सीकरण करता है, इसलिए इसे पूर्व-शुद्ध करना आवश्यक है। विलायक के रूप में टीएचएफ का उपयोग करके, रबर के सभी ब्रांडों, साथ ही थर्मोप्लास्टिक इलास्टोमर्स का विश्लेषण किया जा सकता है। नाइट्राइल ब्यूटाडीन रबर का विश्लेषण करते समय, सॉल्वैंट्स के मिश्रण का उपयोग करने की सलाह दी जाती है, जिनमें से एक रबर के गैर-ध्रुवीय भाग के लिए आकर्षण रखता है, और दूसरा ध्रुवीय के लिए। यदि रेफ्रेक्टोमेट्रिक डिटेक्टर का उपयोग किया जाता है, तो विलायक के लिए एक आवश्यक आवश्यकता विलायक और बहुलक के अपवर्तक सूचकांकों में अंतर है।

पहली बार जेल क्रोमैटोग्राफी के लिए एक उपकरण पाली विश्लेषणमेरोव को बाद में 1964 में वाटर्स द्वारा रिहा कर दिया गया पांच साल बादविधि की खोज. आज के लिए तरल क्रोमैटोग्राफ विश्लेषणपॉलिमर के आणविक द्रव्यमान वितरण (MWD) का उत्पादन सभी औद्योगिक देशों में किया जाता है; KhZh श्रृंखला के क्रोमैटोग्राफ रूस में जाने जाते हैं। विदेशी उपकरणों के नवीनतम संशोधनों में कंपनी "वाटर्स केम. डिव" का एक जेल क्रोमैटोग्राफ है। आणविक भार, एमडब्ल्यूडी और मैक्रोमोलेक्यूल्स के अभिविन्यास की डिग्री निर्धारित करने के लिए एक विस्कोमीटर के साथ। डिवाइस का कैरोसेल डिज़ाइन एक साथ 16 नमूनों का परीक्षण करने की अनुमति देता है।

क्रोमैटोग्राफ के ब्लॉक आरेख में शामिल हैं: ओ डिगैसर ब्लॉक - विलायक से गैसों को हटाने का कार्य करता है और लंबे समय तक विलायक की समान मात्रा को बनाए रखने में मदद करता है।

О डिस्पेंसर ब्लॉक - आपको किसी दिए गए वॉल्यूम का समय पर नमूना पेश करने और स्वचालित मोड में काम करने की अनुमति देता है,

О आधुनिक तरल क्रोमैटोग्राफ में, क्रोमैटोग्राम का पॉलिमर के एमडब्ल्यूडी में रूपांतरण, जिसमें आणविक भार द्वारा डिवाइस का अंशांकन और वाद्य विस्तार के लिए सुधार शामिल है, एक कंप्यूटर का उपयोग करके किया जाता है। इससे स्वीकृत कार्यक्रमों का उपयोग करके अंतर और अभिन्न एमडब्ल्यूडी और औसत आणविक भार मूल्यों की गणना करना संभव हो जाता है। विशेष माइक्रोप्रोसेसर किसी दिए गए प्रोग्राम के अनुसार डिवाइस ब्लॉक के संचालन को नियंत्रित करते हैं।

जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी द्वारा की गई प्रयोगात्मक स्थितियों की रिकॉर्डिंग का एक उदाहरण।स्थापना में निम्नलिखित मुख्य तत्व शामिल हैं; पंप मॉडल 6000ए, सैंपल डिस्पेंसर यू 6के और डिफरेंशियल रेफ्रेक्टोमीटर आर 401। इंस्टॉलेशन में 3 पृथक्करण कॉलम भी शामिल हैं, प्रत्येक 300 मिमी लंबा और 8 मिमी के आंतरिक व्यास के साथ। कॉलम एसडीवी-जेल 5 से भरे हुए हैं, जिसमें 103, 104 और 105 Å (पॉलिमर-स्टैंडर्ड-सर्विस, पीएसएस, मेन्ज़) के छिद्र व्यास हैं। परीक्षण तापमान 22°C है और प्रवाह दर 1.0 मिली/मिनट है। टेट्राहाइड्रोफ्यूरान का उपयोग विलायक के रूप में किया जाता है, 6-10 ग्राम/लीटर के नमूना सांद्रण पर इंजेक्शन की मात्रा 100 μl है। 104-106 ग्राम/मोल के आणविक भार के साथ पॉलीस्टाइनिन का उपयोग करके सार्वभौमिक अंशांकन किया जाता है।

जीपीसी पॉलिमर की रासायनिक संरचना में सूक्ष्म परिवर्तनों के अध्ययन की अनुमति देता है और समग्र एमडब्ल्यूडी निर्धारित करता है, और इसलिए पॉलिमर रसायन विज्ञान में इसका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इलास्टोमर्स के औद्योगिक उत्पादन में, जीपीसी विधि का उपयोग बड़े पैमाने पर उत्पादित उत्पादों के परिचालन गुणवत्ता नियंत्रण और तकनीकी प्रक्रिया के उचित समायोजन के साथ-साथ निर्दिष्ट गुणों के साथ इलास्टोमर्स के उत्पादन के विकास और सुधार के लिए किया जा सकता है। जेल क्रोमैटोग्राफ को स्वचालित प्रक्रिया नियंत्रण प्रणालियों में शामिल किया जा सकता है जो रिएक्टर से सीधे विश्लेषण के लिए नमूने लेते हैं। नमूना तैयार करने सहित विश्लेषण की अवधि 20-30 मिनट है।

विवरण

जेल पारमीशन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी) या दूसरे शब्दों में आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी (एसईसी) के लिए सामग्री और उपकरणों के अग्रणी निर्माताओं में से एक, जर्मन कंपनी पॉलिमर स्टैंडर्ड्स सर्विस (पीएसएस) के साथ मिलकर, हम औसत आणविक भार निर्धारित करने के लिए व्यापक समाधान प्रदान करते हैं। पॉलिमर (प्राकृतिक, सिंथेटिक, बायोपॉलिमर), आणविक भार वितरण और समाधान में पॉलिमर मैक्रोमोलेक्यूल्स की विशेषताओं को महत्व देता है। इस विधि में, विश्लेषक का पृथक्करण स्थिर चरण के साथ सोखने की बातचीत के कारण नहीं होता है, बल्कि केवल मैक्रोमोलेक्यूल्स के हाइड्रोडायनामिक त्रिज्या के अनुसार होता है।

आणविक भार द्वारा अलग किए गए घटकों का पता लगाने के लिए, कम से कम एक एकाग्रताडिटेक्टर (रेफ्रैक्टोमेट्रिक और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक, एचपीएलसी के लिए पारंपरिक, बाष्पीकरणीय प्रकाश बिखरने वाला डिटेक्टर), साथ ही पॉलिमर विश्लेषण के लिए विशेष डिटेक्टर: विस्कोमेट्रिक, डिटेक्टर द्वारा लेजर प्रकाश प्रकीर्णन. एकाग्रता डिटेक्टरों के साथ संयोजन में, ये डिटेक्टर पूर्ण आणविक द्रव्यमान, समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल्स की संरचना, घुमाव की त्रिज्या, हाइड्रोडायनामिक त्रिज्या, शाखा की डिग्री, मार्क-कुह्न-हौविंक समीकरण के स्थिरांक निर्धारित करना संभव बनाते हैं। और वायरल गुणांक। अंशांकन निर्भरता की उपस्थिति में, यह प्रणाली केवल एक विश्लेषण (~ 15 मिनट) में मैक्रोमोलेक्यूलर वस्तुओं और समाधान में उनके व्यवहार के बारे में व्यापक जानकारी प्राप्त करने की अनुमति देती है, जबकि पारंपरिक तरीकों से इन विशेषताओं का मूल्यांकन करने में कई दिन लगते हैं।

माप परिणामों को संसाधित करने के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर का उपयोग करना आवश्यक है। हम जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी) के लिए लचीले मॉड्यूलर एचपीएलसी सिस्टम की पेशकश करते हैं, जिसमें पॉलिमर के एचपीएलसी विश्लेषण के क्षेत्र में एक आधिकारिक विशेषज्ञ, पॉलिमर स्टैंडर्ड सर्विस (पीएसएस) के प्रमुख मॉड्यूल (पंप, कॉलम थर्मोस्टेट, ऑटोसैंपलर, रेफ्रेक्टोमेट्रिक डिटेक्टर) और विशिष्ट मॉड्यूल शामिल हैं। . विश्लेषण परिणामों की गणना करने के लिए, मानक लैबसोल्यूशन एलसी प्रोग्राम में एकीकृत शिमदज़ु जीपीसी विकल्प सॉफ़्टवेयर और विशेष डिटेक्टरों का समर्थन करने वाले पीएसएस - विनजीपीसी एसडब्ल्यू सॉफ़्टवेयर उत्पादों का उपयोग करना संभव है।

पारंपरिक रूप से उपयोग की जाने वाली केशिकाओं और फिटिंग (हेक्साफ्लोरोइसोप्रोपानोल, टेट्राहाइड्रोफ्यूरान) के संबंध में आक्रामक मोबाइल चरणों के साथ काम करने के लिए, एचपीएलसी सिस्टम को एक विशेष डीगैसर, पंप और ऑटोसैम्पलर से लैस करना संभव है, जिनके घटक इन सॉल्वैंट्स के प्रतिरोधी हैं।

जीपीसी के लिए बुनियादी सिस्टम

जीपीसी के लिए बुनियादी एचपीएलसी प्रणाली

जीपीसी के लिए एक बुनियादी एचपीएलसी प्रणाली को एलसी-20 प्रमुख इकाइयों के साथ एक एकाग्रता डिटेक्टर (यूवी-अवशोषित पॉलिमर के लिए स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक/डायोड सरणी एसपीडी-20ए/एसपीडी-एम20ए, यूनिवर्सल रेफ्रेक्टोमेट्रिक आरआईडी-20ए और ईएलएसडी बाष्पीकरणीय प्रकाश बिखरने वाले डिटेक्टर) के साथ कॉन्फ़िगर किया जा सकता है। -एलटी II). यह प्रणाली, उपयुक्त मानकों और अंशांकन निर्भरता की उपस्थिति में, पॉलिमर के सापेक्ष आणविक भार को निर्धारित करने की अनुमति देती है, साथ ही समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल्स के हाइड्रोडायनामिक आकार का अनुमान लगाती है।

मुख्य मॉड्यूल की तकनीकी विशेषताएं
पंप LC-20AD
पम्प प्रकार डबल समानांतर माइक्रोप्लंजर तंत्र
सवार कक्षों की क्षमता 10 μl
एलुएंट प्रवाह दर सीमा 0.0001 - 10 मिली/मिनट
अधिकतम दबाव 40 एमपीए
प्रवाह सेटिंग सटीकता 1% या 0.5 μl (जो भी बेहतर हो)
लहर 0.1 एमपीए (1.0 मिली/मिनट और 7 एमपीए पर पानी के लिए)
संचालन विधा निरंतर प्रवाह, निरंतर दबाव
प्लंजर की स्वचालित फ्लशिंग के लिए पंपों को एक अतिरिक्त उपकरण से सुसज्जित किया जा सकता है। पंप एक रिसाव सेंसर से सुसज्जित हैं। पंप प्लंजर सामग्री आक्रामक मीडिया (नीलम) के लिए प्रतिरोधी है।
रेफ्रेक्टोमेट्रिक डिटेक्टर RID-20A
विकिरण स्रोत टंगस्टन लैंप, परिचालन समय 20,000 घंटे
अपवर्तक सूचकांक रेंज (आरआईयू) 1,00 - 1,75
ऑप्टिकल ब्लॉक का थर्मल नियंत्रण ऑप्टिकल सिस्टम के दोहरे तापमान नियंत्रण के साथ 30 - 60 डिग्री
संचालन प्रवाह सीमा मापने वाले सेल को प्रतिस्थापित किए बिना उपयोग की एक विस्तृत श्रृंखला (विश्लेषणात्मक मोड से प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी तक) में काम करने की क्षमता: विश्लेषणात्मक मोड में 0.0001 से 20 मिलीलीटर/मिनट तक; प्रारंभिक मोड में 150 मिली/मिनट तक
शोर 2.5×10 -9 आरआईयू
बहती 1×7 -7 आरआईयू/घंटा
रैखिकता सीमा विश्लेषणात्मक मोड में 0.01-500×10 -6
1.0-5000×10 -6 प्रारंभिक मोड में
स्ट्रीम लाइन स्विच सोलेनोइड वाल्व
अधिकतम. परिचालन दाब 2 एमपीए (20 किग्रा/सेमी²)
कोशिका आयतन 9 μl
शून्य समायोजन ऑप्टिकल संतुलन (ऑप्टिकल शून्य);
ऑटो-शून्य, आधार रेखा को स्थानांतरित करके शून्य को ठीक करना
मजबूर वायु संवहन STO-20A के साथ कॉलम थर्मोस्टेट
नियंत्रित तापमान सीमा कमरे के तापमान से 10C° ऊपर से 85C° तक
तापमान नियंत्रण सटीकता 0.1C°
थर्मोस्टेट आंतरिक मात्रा 220×365×95 मिमी (7.6 एल)
थर्मोस्टेट क्षमता 6 कॉलम; कॉलम के अलावा, 2 मैनुअल इंजेक्टर, एक ग्रेडिएंट मिक्सर, दो उच्च दबाव स्विचिंग वाल्व (6 या 7 पोर्ट), एक चालकता सेल स्थापित किया जा सकता है
संभावनाएं रैखिक तापमान प्रोग्रामिंग; कॉलम पैरामीटर्स, विश्लेषणों की संख्या, पारित मोबाइल चरण की मात्रा (वैकल्पिक सीएमडी डिवाइस स्थापित करते समय) में परिवर्तन को ट्रैक करना और फ़ाइल में सहेजना
ऑपरेटिंग मापदंडों की निगरानी करना विलायक रिसाव सेंसर; अति ताप संरक्षण प्रणाली

प्रकाश बिखराव डिटेक्टर

SLD7100 MALLS मल्टी-एंगल स्कैटरिंग डिटेक्टर (PSS)

SLD7100 MALLS मल्टी-एंगल स्कैटरिंग डिटेक्टर (PSS) आपको सात कोणों (35, 50, 75, 90, 105, 130, 145°) पर एक साथ स्थैतिक प्रकाश प्रकीर्णन को मापने और आणविक भार के पूर्ण मूल्यों को निर्धारित करने की अनुमति देता है, सच है आणविक भार वितरण पैरामीटर, अनुमान आकार और समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल्स की संरचना। यह डिटेक्टर किसी भी मानक की आवश्यकता को समाप्त करता है और बिना किसी अतिरिक्त संशोधन के एक कैपेसिटिव उपकरण (एचपीएलसी प्रणाली के बिना) के रूप में भी काम कर सकता है।

विस्कोमीटर डिटेक्टर (पीएसएस, जर्मनी)

DVD1260 विस्कोमेट्रिक डिटेक्टर (PSS)

DVD1260 विस्कोमीटर डिटेक्टर (PSS) जब LC-20 प्रॉमिनेंस HPLC सिस्टम के भाग के रूप में उपयोग किया जाता है तो आपको यह निर्धारित करने की अनुमति मिलती है औसत आणविक भार और आणविक भार वितरण पैरामीटर, सार्वभौमिक अंशांकन विधि का उपयोग करते हुए, जटिल और गोलाकार वास्तुकला के साथ मैक्रोमोलेक्यूल्स के लिए अपरिहार्य, साथ ही आंतरिक चिपचिपाहट, मार्क-कुह्न-हौविंक समीकरण के स्थिरांक, शाखा की डिग्री, वायरल गुणांक और समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल्स की संरचना, पहले से ही कुछ मॉडलों पर आधारित है। सॉफ्टवेयर में शामिल है. डिटेक्टर की अद्वितीय मापने वाली सेल एक चार-हाथ वाला असममित केशिका पुल है, जो बाजार में उपलब्ध सभी एनालॉग्स के विपरीत, होल्ड-अप कॉलम नहीं रखता है - एक विशेष कमजोर पड़ने वाला टैंक तुलनात्मक सर्किट में बनाया गया है, जो विश्लेषण समय को कम करता है कम से कम आधे से और नकारात्मक सिस्टम चोटियों की उपस्थिति से बचें। सेल में तापमान बनाए रखने में त्रुटि है 0.01°C से कम, जो विस्कोमेट्रिक विश्लेषण में प्राथमिक महत्वपूर्ण कारक है।

विशेष विवरण:
पोषण 110 से 260 वी तक; 50/60 हर्ट्ज़; 100 वीए
दबाव अंतर (डीपी) रेंज -0.6 केपीए - 10.0 केपीए
इनलेट प्रेशर (आईपी) रेंज 0-150 केपीए
कोशिका आयतन मापना 15 μl
तनुकरण मुआवजा मात्रा (टैंक) 70 मि.ली
कतरनी दर (1.0 मिली/मिनट) < 2700 с -1
शोर स्तर 0.2 पा, अंतर दबाव संकेत, 5 डिग्री सेल्सियस
अनुरूप उत्पादन 1.0 वी/10 केपीए एफएसडी दबाव अंतर
1.0 वी/200 केपीए एफएसडी इनलेट दबाव
कुल डिटेक्टर वॉल्यूम लगभग 72 मि.ली. (टैंक सहित)
अधिकतम. प्रवाह दर 1.5 मिली/मिनट
तापमान सेटिंग सटीकता ±0.5 डिग्री सेल्सियस
तापमान स्थिरता 0.01°C से अधिक ख़राब नहीं
डिजिटल इंटरफ़ेस आरएस-232सी, यूएसबी, ईथरनेट
डेटा अंतरण दर (बॉड) 1200 - 115200
डिजिटल इनपुट फ्लशिंग, जीरोइंग, इंजेक्शन, त्रुटि
डिजिटल आउटपुट इंजेक्शन, त्रुटि
वज़न लगभग 4 किलो
आयाम (डब्ल्यू, एच, डी) 160×175×640 मिमी

सामान


जीपीसी मोड में काम करने और अंशांकन संबंध बनाने के लिए, हम एक विस्तृत चयन की पेशकश करते हैं वक्ताओंजैल (स्थिर चरण) और रासायनिक प्रकृति (ध्रुवीय और गैर-ध्रुवीय) की एक विस्तृत विविधता के एलुएंट से भरे जीपीसी के लिए, जिसका उद्देश्य उच्च-आणविक पॉलिमर और ऑलिगोमर्स दोनों के विश्लेषण के साथ-साथ मानक बहुलक वस्तुएं.

जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी, एसईसी) के लिए कॉलम:

  • किसी भी कार्बनिक एलुएंट के लिए: पीएसएस एसडीवी, जीआरएएम, पीएफजी, पोलेफिन (200 डिग्री सेल्सियस तक);
  • जलीय एल्युएंट्स के लिए: पीएसएस सुप्रीमा, नोवेमा, एमसीएक्स प्रोटीमा;
  • बिल्कुल रैखिक अंशांकन प्राप्त करने के लिए मोनोडिस्पर्स छिद्र आकार वितरण या मिश्रित प्रकार वाले कॉलम;
  • निम्न और उच्च एमएम मान निर्धारित करने के लिए;
  • पता लगाने योग्य आणविक भार की सीमा का विस्तार करने के लिए तैयार कॉलम सेट;
  • सिंथेटिक और बायोपॉलिमर के लिए;
  • माइक्रो जीपीसी से प्रारंभिक प्रणालियों तक समाधान;
  • त्वरित विभाजन के लिए कॉलम.

कॉलम आपकी पसंद के किसी भी एलुएंट में उपलब्ध कराए जा सकते हैं।

जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी, एसईसी) के लिए मानक:

  • व्यक्तिगत मानक नमूने और मानकों के तैयार सेट;
  • कार्बनिक सॉल्वैंट्स में घुलनशील:
    • POLYSTYRENE
    • पॉली(α-मिथाइलस्टाइरीन)
    • पॉलिमिथाइल मेथाक्रायलेट
    • पॉली (एन-ब्यूटाइल मेथैक्रिलेट)
    • पॉली (टर्ट-ब्यूटाइल मेथैक्रिलेट)
    • पॉलीब्यूटाडीन-1,4
    • पॉलीआइसोप्रीन-1,4
    • POLYETHYLENE
    • पॉली(2-विनाइलपाइरीडीन)
    • पॉलीडिमिथाइलसिलोक्सेन
    • पॉलीथीन टैरीपिथालेट
    • पॉलीआइसोब्यूटिलीन
    • पॉलीलैक्टाइड
  • जलीय प्रणालियों में घुलनशील:
    • डेक्सट्रान
    • पुलुलान
    • हाइड्रोक्सीएथाइल स्टार्च
    • पॉलीथीन ग्लाइकोल और पॉलीथीन ऑक्साइड
    • पॉलीमेथैक्रेलिक एसिड का ना-नमक
    • पॉलीएक्रेलिक एसिड का ना-नमक
    • पॉली का ना-नमक (पी-स्टाइरेनसल्फोनिक एसिड)
    • पॉलीविनायल अल्कोहल
    • प्रोटीन
  • MALDI मानक, प्रकाश प्रकीर्णन डिटेक्टरों (एलएसडी) और विस्कोमेट्री के सत्यापन के लिए किट;
  • ड्यूटेरेटेड पॉलिमर;
  • कस्टम-निर्मित पॉलिमर और मानक।

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी तरल क्रोमैटोग्राफी का एक प्रकार है जिसमें पृथक्करण सॉर्बेंट के छिद्रों के अंदर स्थित विलायक और उसके कणों के बीच बहने वाले विलायक के बीच अणुओं के वितरण के कारण होता है, अर्थात। स्थिर चरण एक छिद्रपूर्ण शरीर या जेल है, और पदार्थों की अलग-अलग अवधारण पदार्थों के अणुओं के आकार, उनके आकार और स्थिर चरण के छिद्रों में प्रवेश करने की क्षमता में अंतर के कारण होती है। विधि का नाम अंग्रेजी शब्द से प्रक्रिया के तंत्र को दर्शाता है "बिना नाप का", जिसका अर्थ है आकार अपवाद। जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी) एक आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी है जिसमें एक जेल स्थिर चरण के रूप में कार्य करता है।

एचपीएलसी के अन्य संस्करणों के विपरीत, जहां सॉर्बेंट की सतह के साथ घटकों के विभिन्न इंटरैक्शन के कारण पृथक्करण होता है, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में एक ठोस भराव की भूमिका केवल एक निश्चित आकार के छिद्र बनाने के लिए होती है, और स्थिर चरण विलायक होता है इन छिद्रों को भर देता है.

विधि की मूलभूत विशेषता लगभग किसी भी आणविक भार की सीमा में अणुओं को उनके आकार के आधार पर अलग करने की क्षमता है - 10 2 से 10 8 तक, जो इसे सिंथेटिक उच्च-आणविक पदार्थों और बायोपॉलिमर के अध्ययन के लिए अपरिहार्य बनाती है।

आइए विधि के मूलभूत सिद्धांतों पर विचार करें। बहिष्करण स्तंभ का आयतन तीन शब्दों के योग के रूप में व्यक्त किया जा सकता है:

वी सी = वी एम+वी मैं+वीडी,

जहां वी एम- मृत मात्रा (शर्बत कणों के बीच विलायक की मात्रा, दूसरे शब्दों में, मोबाइल चरण की मात्रा); वी मैं- विलायक द्वारा व्याप्त छिद्र की मात्रा (स्थिर चरण की मात्रा); वी डी छिद्रों को छोड़कर सॉर्बेंट मैट्रिक्स का आयतन है। कॉलम वी टी में विलायक की कुल मात्रा मोबाइल और स्थिर चरणों की मात्रा का योग है:

वी टी = वी एम+वी मैं .

आकार बहिष्करण कॉलम में अणुओं की अवधारण छिद्रों में उनके प्रसार की संभावना से निर्धारित होती है और मुख्य रूप से अणुओं और छिद्रों के आकार के अनुपात पर निर्भर करती है। वितरण गुणांक केडी, तरल क्रोमैटोग्राफी के अन्य प्रकारों की तरह, स्थिर और मोबाइल चरणों में किसी पदार्थ की सांद्रता का अनुपात है:

के डी = सी 1 /सी 0

चूँकि गतिशील और स्थिर चरणों की संरचना समान होती है, किसी पदार्थ का Kd जिसके लिए दोनों चरण समान रूप से सुलभ होते हैं, एकता के बराबर होता है। यह स्थिति सबसे छोटे आकार (विलायक अणुओं सहित) वाले अणुओं के लिए होती है, जो सभी छिद्रों में प्रवेश करते हैं और इसलिए स्तंभ के माध्यम से सबसे धीमी गति से चलते हैं। उनकी बरकरार रखी गई मात्रा विलायक वीटी की कुल मात्रा के बराबर है। सभी अणु जिनका आकार सॉर्बेंट छिद्रों के आकार से बड़ा है, उनमें प्रवेश नहीं कर सकते (पूर्ण बहिष्करण) और कणों के बीच के चैनलों से नहीं गुजर सकते। वे मोबाइल चरण वी की मात्रा के बराबर समान अवधारण मात्रा के साथ कॉलम से निकलते हैं एम. इन अणुओं का वितरण गुणांक शून्य है।

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में नमूना पृथक्करण और पता लगाने का सिद्धांत।
ए - नमूना इनपुट; बी - आकार के अनुसार विभाजन; सी - बड़े मैक्रोमोलेक्यूल्स की उपज;
डी छोटे मैक्रोमोलेक्यूल्स की उपज है।

किसी नमूने की अवधारण मात्रा और आणविक भार (या आणविक आकार) के बीच संबंध को आंशिक अंशांकन वक्र द्वारा वर्णित किया गया है, अर्थात। प्रत्येक विशिष्ट सॉर्बेंट को अपने स्वयं के अंशांकन वक्र की विशेषता होती है, जिसका उपयोग उस पर अलग किए जा सकने वाले आणविक द्रव्यमान की सीमा का अनुमान लगाने के लिए किया जाता है। बिंदु A बहिष्करण सीमा, या स्तंभ V की मृत मात्रा से मेल खाता है एम. वे सभी अणु जिनका द्रव्यमान बिंदु A से अधिक है, अवधारण आयतन V के साथ एक शिखर के साथ उत्सर्जित होंगे एम. बिंदु बी पारगमन सीमा को दर्शाता है, और सभी अणु जिनका द्रव्यमान बिंदु बी से कम है, वे भी अवधारण मात्रा वी टी के साथ एक शिखर में स्तंभ से बाहर निकलेंगे। बिंदु A और B के बीच चयनात्मक पृथक्करण सीमा है। संगत मात्रा

वी मैं= वी टी - वी एम

इसे आमतौर पर कॉलम का कार्यशील आयतन कहा जाता है। खंड सीडी निर्देशांक वी आर में निर्मित एक निजी अंशांकन वक्र का एक रैखिक खंड है - एलजीएम। यह अनुभाग समीकरण द्वारा वर्णित है

वी आर = सी 1 - सी 2 एलजीएम,

जहां सी 1 खंड सीडी की निरंतरता द्वारा कोटि अक्ष पर काटा गया खंड है, सी 2 कोटि अक्ष पर इस खंड के झुकाव के कोण की स्पर्शरेखा है। C2 के मान को स्तंभ की पृथक्करण क्षमता कहा जाता है; इसे आणविक भार में परिमाण परिवर्तन के एक क्रम के अनुसार विलायक के मिलीलीटर की संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है। पृथक्करण क्षमता जितनी बड़ी होगी, किसी दिए गए द्रव्यमान सीमा में पृथक्करण उतना ही अधिक चयनात्मक होगा। अंशांकन वक्र (अनुभाग एसी और बीडी) के गैर-रेखीय क्षेत्रों में, सी2 में कमी के कारण, अंशांकन दक्षता काफ़ी कम हो जाती है। इसके अलावा, के बीच गैर-रैखिक संबंध एलजीएम और वीआर डेटा प्रोसेसिंग को काफी जटिल बनाते हैं और परिणामों की सटीकता को कम करते हैं। इसलिए, कोई एक स्तंभ (या स्तंभों का सेट) का चयन करने का प्रयास करता है ताकि विश्लेषण किए गए बहुलक का पृथक्करण अंशांकन वक्र के रैखिक क्षेत्र के भीतर हो।

यदि कोई पदार्थ वीटी से अधिक बरकरार मात्रा के साथ उत्सर्जित होता है, तो यह अन्य पृथक्करण तंत्र (अक्सर सोखना) की अभिव्यक्ति को इंगित करता है। सोखने का प्रभाव आमतौर पर कठोर सॉर्बेंट्स पर होता है, लेकिन कभी-कभी अर्ध-कठोर जैल पर भी देखा जाता है, जाहिर तौर पर जेल मैट्रिक्स के लिए बढ़ती आत्मीयता के कारण। एक उदाहरण स्टाइरीन-डिवाइनिलबेंजीन जैल पर सुगंधित यौगिकों का सोखना है।

जाहिरा तौर पर, पॉलिमर-सॉर्बेंट-सॉल्वेंट सिस्टम में इंटरैक्शन मापदंडों को बदलकर, कोई सोखना तंत्र से बहिष्करण तंत्र पर स्विच कर सकता है और इसके विपरीत। सामान्य तौर पर, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी सोखना और अन्य दुष्प्रभावों को पूरी तरह से दबाने का प्रयास करती है, क्योंकि वे, विशेष रूप से पॉलिमर के आणविक भार वितरण (एमडब्ल्यूडी) का अध्ययन करते समय, विश्लेषण के परिणामों को महत्वपूर्ण रूप से विकृत कर सकते हैं। हस्तक्षेप करने वाले कारकों में से एक हाइड्रोडायनामिक क्रोमैटोग्राफी मोड है, जिसमें स्थिर चरण की भूमिका स्तंभ (चैनल) की दीवारों द्वारा निभाई जाती है और प्रवाह दर में अंतर के कारण मैक्रोमोलेक्यूल्स या कणों के मिश्रण का पृथक्करण होता है। बूंद की धुरी के साथ और उसकी दीवारों पर मोबाइल चरण, साथ ही उनके आकार के अनुसार क्रॉस सेक्शन चैनलों पर अलग-अलग कणों के वितरण के कारण।

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी और अन्य विकल्पों के बीच मूलभूत अंतर उपयोग की जाने वाली विशिष्ट प्रणाली में विश्लेषण की पूर्व ज्ञात अवधि, उनके अणुओं के आकार के आधार पर घटकों के क्षालन के क्रम की भविष्यवाणी करने की क्षमता, चोटियों की लगभग समान चौड़ाई है। चयनात्मक पृथक्करण की पूरी श्रृंखला, और काफी कम समय में नमूने के सभी घटकों की उपज में विश्वास, संबंधित मात्रा वी टी। इस पद्धति का उपयोग मुख्य रूप से पॉलिमर के एमडब्ल्यूडी का अध्ययन करने और जैविक मूल (प्रोटीन, न्यूक्लिक एसिड, आदि) के मैक्रोमोलेक्यूल्स का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है, लेकिन ये विशेषताएं इसे पॉलिमर में कम आणविक भार अशुद्धियों के विश्लेषण और नमूनों के प्रारंभिक पृथक्करण के लिए बेहद आशाजनक बनाती हैं। अज्ञात रचना का. इससे प्राप्त जानकारी किसी दिए गए नमूने के विश्लेषण के लिए सर्वोत्तम एचपीएलसी विकल्प के चयन की सुविधा प्रदान करती है। इसके अलावा, विभिन्न प्रकार के एचपीएलसी को मिलाकर जटिल मिश्रणों को अलग करने में माइक्रोप्रिपेरेटिव आकार बहिष्करण पृथक्करण का उपयोग अक्सर पहले चरण के रूप में किया जाता है।

पॉलिमर की आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी मोबाइल चरण प्रवाह की स्थिरता पर सबसे कठोर आवश्यकताएं रखती है। पॉलिमर के आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में परिणामों की सटीकता स्पष्ट रूप से तापमान पर निर्भर करती है। जब इसमें 10°C परिवर्तन होता है, तो औसत आणविक भार निर्धारित करने में त्रुटि ±10% से अधिक हो जाती है। इसलिए, एचपीएलसी के इस संस्करण में, पृथक्करण प्रणाली की थर्मोस्टेटिंग अनिवार्य है। एक नियम के रूप में, 80-100 डिग्री सेल्सियस तक की सीमा के भीतर ±1 डिग्री सेल्सियस के तापमान को बनाए रखने की सटीकता पर्याप्त है। कुछ मामलों में, उदाहरण के लिए, पॉलीथीन और पॉलीप्रोपाइलीन का विश्लेषण करते समय, ऑपरेटिंग तापमान 135-150°C होता है। पॉलिमर के आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में सबसे आम डिटेक्टर एक विभेदक रेफ्रेक्टोमीटर है।

किसी विशिष्ट विश्लेषणात्मक समस्या को हल करने के लिए इष्टतम स्थिति प्रदान करने वाले शर्बत का चयन कई चरणों में किया जाता है। जेल मैट्रिक्स रासायनिक रूप से निष्क्रिय होना चाहिए, अर्थात। आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी के दौरान, अलग किए गए मैक्रोमोलेक्यूल्स का रासायनिक बंधन नहीं होना चाहिए। मैट्रिक्स के संपर्क में आने पर प्रोटीन, एंजाइम और न्यूक्लिक एसिड को अलग करते समय विकृतीकरण नहीं होना चाहिए। प्रारंभ में, विश्लेषण किए गए पदार्थों की रासायनिक संरचना या घुलनशीलता पर डेटा के आधार पर, यह निर्धारित किया जाता है कि प्रक्रिया के किस संस्करण का उपयोग किया जाना चाहिए - जलीय प्रणालियों में या कार्बनिक सॉल्वैंट्स में क्रोमैटोग्राफी, जो काफी हद तक आवश्यक शर्बत के प्रकार को निर्धारित करती है। कार्बनिक सॉल्वैंट्स में निम्न और मध्यम ध्रुवता वाले पदार्थों का पृथक्करण अर्ध-कठोर और कठोर दोनों जैल पर सफलतापूर्वक किया जा सकता है। ध्रुवीय समूहों वाले हाइड्रोफोबिक पॉलिमर के एमडब्ल्यूडी का अध्ययन अक्सर स्टाइरीन-डिवाइनिलबेंजीन जैल वाले स्तंभों पर किया जाता है, क्योंकि इस मामले में सोखने के प्रभाव व्यावहारिक रूप से प्रकट नहीं होते हैं और मोबाइल चरण में संशोधक को जोड़ने की आवश्यकता नहीं होती है, जो काफी सरल बनाता है। विलायक की तैयारी और पुनर्जनन।

जलीय प्रणालियों में काम के लिए, मुख्य रूप से कठोर शर्बत का उपयोग किया जाता है; कभी-कभी विशेष प्रकार के अर्ध-कठोर जैल से बहुत अच्छे परिणाम प्राप्त किए जा सकते हैं। फिर, अंशांकन वक्रों या अंशांकन सीमा पर डेटा का उपयोग करके, नमूने के आणविक भार पर उपलब्ध जानकारी को ध्यान में रखते हुए, आवश्यक सरंध्रता का एक शर्बत चुना जाता है। यदि विश्लेषण किए जा रहे मिश्रण में ऐसे पदार्थ हैं जो आणविक भार में परिमाण के 2-2.5 आदेशों से अधिक भिन्न नहीं हैं, तो आमतौर पर उन्हें समान छिद्र आकार वाले स्तंभों पर अलग करना संभव है। व्यापक द्रव्यमान सीमा के लिए, विभिन्न छिद्रों के शर्बत वाले कई स्तंभों के सेट का उपयोग किया जाना चाहिए। इस मामले में, व्यक्तिगत सॉर्बेंट्स के लिए वक्र जोड़कर अनुमानित अंशांकन निर्भरता प्राप्त की जाती है।

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में प्रयुक्त सॉल्वैंट्स को निम्नलिखित बुनियादी आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए:

1) पृथक्करण तापमान पर नमूने को पूरी तरह से भंग कर दें;

2) सॉर्बेंट की सतह को गीला करें और कॉलम की दक्षता को ख़राब न करें;

3) सॉर्बेंट की सतह के साथ अलग किए गए पदार्थों के सोखने (और अन्य इंटरैक्शन) को रोकें;

4) उच्चतम संभव पहचान संवेदनशीलता सुनिश्चित करें;

5) कम चिपचिपापन और विषाक्तता है।

इसके अलावा, पॉलिमर का विश्लेषण करते समय, विलायक की थर्मोडायनामिक गुणवत्ता आवश्यक है: यह अत्यधिक वांछनीय है कि पॉलिमर को अलग करने और जेल मैट्रिक्स के संबंध में यह "अच्छा" हो, यानी। एकाग्रता का प्रभाव अधिकतम रूप से व्यक्त किया गया।


TSK जेल G2000PW, PF 0.05 M NaCl समाधान, प्रवाह दर 1 मिली/मिनट, दबाव 2 MPa, तापमान 40°C, रेफ्रेक्टोमेट्रिक डिटेक्टर के साथ 2(600x7.5) मिमी मिश्रित कॉलम पर प्राप्त पॉलीइथाइलीन ग्लाइकोल ऑलिगोमर्स का क्रोमैटोग्राम।

नमूना घुलनशीलता आमतौर पर उपयुक्त मोबाइल चरणों की सीमा को सीमित करने वाला मुख्य सीमित कारक है। अपने जटिल गुणों के कारण सिंथेटिक पॉलिमर के आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी के लिए सबसे अच्छा कार्बनिक विलायक THF है। इसमें अद्वितीय विलायक गुण, कम चिपचिपापन और विषाक्तता है, यह कई अन्य विलायकों की तुलना में स्टाइरीन-डिवाइनिलबेंजीन जैल के साथ बेहतर संगत है, और आम तौर पर 220 एनएम तक के क्षेत्र में रेफ्रेक्टोमीटर या यूवी डिटेक्टर का उपयोग करते समय उच्च पहचान संवेदनशीलता प्रदान करता है। अत्यधिक ध्रुवीय और टेट्राहाइड्रोफ्यूरान-अघुलनशील पॉलिमर (पॉलियामाइड्स, पॉलीएक्रिलोनिट्राइल, पॉलीइथाइलीन टेरेफ्थेलेट, पॉलीयुरेथेन्स, आदि) के विश्लेषण के लिए, आमतौर पर डाइमिथाइलफॉर्मामाइड या μ-क्रेसोल का उपयोग किया जाता है, और कम ध्रुवीय पॉलिमर को अलग करने के लिए, उदाहरण के लिए, विभिन्न रबर और पॉलीसिलोक्सेन, अक्सर टोल्यूनि या क्लोरोफॉर्म में किया जाता है। आईआर डिटेक्टर के साथ काम करते समय उत्तरार्द्ध भी सबसे अच्छे सॉल्वैंट्स में से एक है। हे-डाइक्लोरोबेंजीन और 1,2,4-ट्राइक्लोरोबेंजीन का उपयोग पॉलीओलेफ़िन (आमतौर पर 135 डिग्री सेल्सियस पर) के उच्च तापमान क्रोमैटोग्राफी के लिए किया जाता है जो अन्यथा अघुलनशील होते हैं। इन सॉल्वैंट्स में बहुत अधिक अपवर्तक सूचकांक होता है, इसलिए कभी-कभी कम अपवर्तक सूचकांक वाले पॉलिमर के विश्लेषण के लिए टेट्राहाइड्रोफ्यूरान के बजाय उनका उपयोग करना उपयोगी होता है, जो रेफ्रेक्टोमीटर द्वारा पता लगाए जाने पर संवेदनशीलता में वृद्धि की अनुमति देता है।

उच्च तापमान आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी स्थितियों के तहत सॉल्वैंट्स और अर्ध-कठोर जैल के ऑक्सीकरण को रोकने के लिए। हे-डाइक्लोरोबेंजीन और 1,2,4-ट्राइक्लोरोबेंजीन में एंटीऑक्सीडेंट (आयनोल, सैंटोनॉक्स आर, आदि) मिलाए जाते हैं।

हार्ड सॉर्बेंट पीएच वाले किसी भी मोबाइल चरण के साथ संगत होते हैं<8-8.5. При более высоких значениях рН силикагель начинает растворяться и колонка необратимо теряет эффективность. Стиролдивинилбензольные гели совместимы в основном с элюентами умеренной полярности. Для работы на колонках с μ-стирогелем (от 1000Å и выше) пригодны тетрагидрофуран, ароматические и хлорированные углеводороды, гексан, циклогексан, диоксан, трифторэтанол, гексафторпропанол и диметилформамид.

विभिन्न सॉल्वैंट्स में जेल कणों की सूजन की डिग्री समान नहीं होती है, इसलिए इन सॉर्बेंट्स के साथ कॉलम में एलुएंट को बदलने से जेल की मात्रा में परिवर्तन और रिक्तियों के गठन के कारण दक्षता में कमी आ सकती है। अनुपयुक्त सॉल्वैंट्स (एसीटोन, अल्कोहल) का उपयोग करते समय, जेल इतनी दृढ़ता से सिकुड़ जाता है कि स्तंभ निराशाजनक रूप से क्षतिग्रस्त हो जाता है। छोटे छिद्र आकार वाले सॉर्बेंट्स (जैसे कि μ-स्टायरोगेल 100E और 500E) के लिए, ऐसा संकोचन ध्रुवीय और गैर-ध्रुवीय सॉल्वैंट्स दोनों में देखा जाता है, इसलिए, इसके अलावा, उनका उपयोग संतृप्त हाइड्रोकार्बन, फ्लोरिनेटेड अल्कोहल और डाइमिथाइलफोर्माइड में नहीं किया जा सकता है। एक सुविधाजनक, हालांकि बहुत महंगा तरीका उपयोग किए गए प्रत्येक विलायक के लिए कॉलम के अलग-अलग सेट का उपयोग करना है। इस उद्देश्य के लिए, कुछ कंपनियां समान छिद्र आकार वाले कॉलम का उत्पादन करती हैं, जो विभिन्न सॉल्वैंट्स - टेट्राहाइड्रोफ्यूरान, टोल्यूनि, क्लोरोफॉर्म और डीएमएफ से भरे होते हैं।

मैक्रोमोलेक्युलस के पृथक्करण के दौरान, बैंड के धुंधला होने में मुख्य योगदान बाधित द्रव्यमान स्थानांतरण द्वारा निर्धारित होता है। दुर्भाग्य से, उपयोग किए गए कई एलुएंट्स में उच्च चिपचिपाहट होती है। चिपचिपाहट को कम करने (साथ ही घुलनशीलता में सुधार) के लिए, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी अक्सर ऊंचे तापमान पर की जाती है, जो क्रोमैटोग्राफी प्रणाली की दक्षता में काफी सुधार करती है।

कठोर जैल पर अधिकांश पॉलिमर का विश्लेषण अक्सर उनके सोखने से जटिल होता है। सोखने को दबाने के लिए, आमतौर पर सॉल्वैंट्स का उपयोग किया जाता है जो एनालिटिक्स की तुलना में कॉलम पैकिंग पर अधिक दृढ़ता से सोख लेते हैं। यदि किसी कारण से यह संभव नहीं है, तो मोबाइल चरण को ध्रुवीय संशोधक का 0.1-2% जोड़कर संशोधित किया जाता है, उदाहरण के लिए टेट्राहाइड्रोफ्यूरान। अधिक मजबूत संशोधक विभिन्न आणविक भार (पीईजी-200, पीईजी-400, कार्बोवैक्स 20 एम) के साथ एथिलीन ग्लाइकॉल और पॉलीग्लाइकोल हैं। कभी-कभी, उदाहरण के लिए, डाइमिथाइलफॉर्मामाइड में पॉलीएसिड का विश्लेषण करते समय, पर्याप्त रूप से मजबूत एसिड को जोड़ने की आवश्यकता होती है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि संशोधक जोड़कर सोखना को पूरी तरह से समाप्त करना हमेशा संभव नहीं होता है। ऐसे मामलों में, अर्ध-कठोर जैल का उपयोग किया जाना चाहिए। कुछ पॉलिमर केवल अत्यधिक ध्रुवीय सॉल्वैंट्स (एसीटोन, डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड, आदि) में अच्छी तरह से घुलते हैं, जो स्टाइरीन-डिवाइनिलबेंजीन जैल के साथ असंगत होते हैं। उन्हें कठोर शर्बत पर अलग करते समय, विलायक का चुनाव ऊपर उल्लिखित सामान्य सिद्धांतों के अनुसार किया जाता है।

जलीय मीडिया में आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी की अपनी विशिष्ट विशेषताएं हैं। कई अलग-अलग प्रणालियों (प्रोटीन, एंजाइम, पॉलीसेकेराइड, पॉलीइलेक्ट्रोलाइट्स, आदि) की विशिष्टताओं और उपयोग किए जाने वाले सॉर्बेंट्स की विविधता के कारण, विभिन्न अवांछनीय प्रभावों को दबाने के लिए पीएफ की संरचना में कई भिन्नताएं हैं। डेक्सट्रान जैल (सेफैडेक्स), पॉलीएक्रिलामाइड, हाइड्रॉक्सीएक्रिल मेथैक्रिलेट जैल, एगरोज़ जैल आदि का उपयोग सॉर्बेंट के रूप में किया जाता है। आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी की प्रक्रिया में, मैक्रोमोलेक्यूल्स का व्यवहार मुख्य रूप से उनके हाइड्रोडायनामिक आकार और प्रोटीन, एंजाइमों की एक विशिष्ट विशेषता से निर्धारित होता है। और सिंथेटिक पॉलीइलेक्ट्रोलाइट्स समाधान के पीएच और आयनिक शक्ति पर मैक्रोमोलेक्यूल्स के आकार की निर्भरता है। समाधान की पीएच और आयनिक शक्ति जितनी कम होगी, मैक्रोमोलेक्यूल्स की प्रकट संरचनाएं उतनी ही अधिक अनुकूल होंगी (तथाकथित पॉलीइलेक्ट्रोलाइट सूजन)। इस मामले में, औसत सांख्यिकीय आकार बढ़ जाता है, जिससे आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी मोड में अवधारण मात्रा में कमी आती है। संशोधन के सामान्य तरीकों में विभिन्न लवणों को जोड़ना और एक निश्चित पीएच मान के साथ बफर समाधान का उपयोग करना शामिल है। विशेष रूप से पीएच को बनाए रखना<4 дает возможность подавить слабую ионообменную активность силикагелей, обусловленную присутствием на их поверхности кислых силанольных групп. Требуемая ионная сила подвижной фазы достигается при концентрации буферного раствора 0,05-0,6М; оптимальную концентрацию подбирают экспериментально. Для предотвращения ионообменной сорбции катионных соединений наиболее часто используют такой активный модификатор, как тетраметиламмонийфосфат при рН=3. Однако при разделении некоторых белков могут проявляться гидрофобные взаимодействия, в свою очередь осложняющие эксклюзионный механизм разделения. Те же эффекты иногда проявляются и при работе с дезактивированными гидрофильными сорбентами. Для их устранения к растворителю добавляют метанол. Иногда в водную подвижную фазу вводят полярные органические растворители, полигликоли, кислоты, основания и поверхностно-активные вещества.

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी के अनुप्रयोग का सबसे महत्वपूर्ण क्षेत्र उच्च आणविक भार यौगिकों का अध्ययन है। जैसा कि सिंथेटिक पॉलिमर पर लागू होता है, इस विधि ने उनके आणविक भार विशेषताओं को निर्धारित करने के लिए तेजी से अग्रणी स्थान ले लिया है और अन्य प्रकार की विविधता का अध्ययन करने के लिए इसका गहनता से उपयोग किया जाता है। बायोपॉलिमर रसायन विज्ञान में, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी का व्यापक रूप से मैक्रोमोलेक्यूल्स को विभाजित करने और उनके आणविक भार निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है।

उच्च आणविक भार सिंथेटिक पॉलिमर के आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी की मूलभूत विशेषता मिश्रण को अलग-अलग यौगिकों में अलग करने की असंभवता है। ये पदार्थ पॉलिमराइजेशन की अलग-अलग डिग्री के साथ पॉलिमर होमोलॉग का मिश्रण हैं और तदनुसार, विभिन्न आणविक द्रव्यमान एम मैं. ऐसे मिश्रण के आणविक भार का अनुमान कुछ औसत मूल्य से लगाया जा सकता है, जो औसत विधि पर निर्भर करता है। प्रत्येक आणविक भार एम के अणुओं की सामग्री मैंया तो बहुलक अणुओं की कुल संख्या में उनके संख्यात्मक अंश द्वारा, या उनके कुल द्रव्यमान में उनके द्रव्यमान अंश द्वारा निर्धारित किया जाता है। आमतौर पर, एक बहुलक की विशेषता इन विधियों द्वारा पाए गए औसत मूल्यों से होती है, जिन्हें क्रमशः संख्या औसत एम कहा जाता है एनऔर औसत द्रव्यमान एम डब्ल्यूआणविक वजन। एम मान एनउदाहरण के लिए, क्रायोस्कोपी, ऑस्मोमेट्री, एबुलियोस्कोपी और एम के मान दें डब्ल्यू- प्रकाश प्रकीर्णन और अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन।

यदि हम आणविक भार M वाले अणुओं की संख्या को निरूपित करते हैं मैंएन के माध्यम से मैं, तो बहुलक का कुल द्रव्यमान इसके माध्यम से व्यक्त किया जा सकता है Σ एम मैंएन मैं , द्रव्यमान M वाले अणुओं का संख्यात्मक अंश मैंएन के माध्यम से मैं / Σ एन मैं , और द्रव्यमान एम के साथ अणुओं का द्रव्यमान अंश मैं- के माध्यम से एफमैं= एम मैंएन मैं / Σ एम मैंएन मैं . इन अंशों के अनुरूप कुल बहुलक द्रव्यमान का भाग निर्धारित करने के लिए, उन्हें एम से गुणा किया जाता है मैं .

सभी मात्राओं के लिए प्राप्त मूल्यों का योग करके, औसत आणविक भार प्राप्त किया जाता है:

एम एन = Σ 1 /( च मैं/एम मैं ) = (Σ एम मैंएन मैं )/(Σ एन मैं )

एम डब्ल्यू = Σ एम मैं च मैं = (Σ एम मैं 2 एन मैं )/(Σ एम मैंएन मैं )

अनुपात एम डब्ल्यू>/एम एनपॉलिमर की बहुविक्षेपणता की विशेषता है।

व्यवहार में, पॉलिमर का आणविक भार अक्सर विस्कोमेट्री द्वारा निर्धारित किया जाता है। चिपचिपापन-औसत आणविक भार मार्क-कुह्न-हौविंक समीकरण का उपयोग करके पाया जाता है:

[η ] = के η / एम η ए

जहां [η ] आंतरिक चिपचिपाहट है; K η, a किसी दिए गए तापमान पर दिए गए बहुलक-विलायक प्रणाली के लिए स्थिरांक हैं।

मात्रा M η को समीकरण द्वारा वर्णित किया गया है

एम η = ( Σ एम मैंए च मैं ) 1/ए

एक नियम के रूप में, औसत आणविक भार के मान असमानता को संतुष्ट करते हैं

एम डब्ल्यू> एम η > एम एन

आमतौर पर, एक पॉलिमर नमूने को एम मानों के एक सेट द्वारा चित्रित किया जाता है डब्ल्यू, एम η , एम एनऔर एम डब्ल्यू/एम η , लेकिन यह पर्याप्त नहीं हो सकता है। किसी नमूने की आणविक भार विविधता के बारे में सबसे संपूर्ण जानकारी एमएमडी वक्रों द्वारा प्रदान की जाती है। आकार बहिष्करण पृथक्करण प्रक्रिया से प्राप्त एक विशिष्ट क्रोमैटोग्राम एक या अधिक मैक्सिमा के साथ काफी चिकना वक्र होता है। इस वक्र से, अंशांकन निर्भरता और संबंधित गणनाओं का उपयोग करके, बहुलक की औसत आणविक विशेषताओं और एमडब्ल्यूडी के मूल्यों को अंतर या अभिन्न रूप में निर्धारित किया जाता है।

इस विधि में, विश्लेषण किए जाने वाले समाधान को सूजे हुए दानेदार जेल (स्थिर चरण) से भरे एक स्तंभ के माध्यम से पारित किया जाता है। जेल कणों में एक उच्च आणविक भार यौगिक (एचएमसी) होता है जिसमें एक नेटवर्क संरचना होती है (लचीले मैक्रोमोलेक्यूल्स रासायनिक क्रॉस-लिंक द्वारा क्रॉस-लिंक किए जाते हैं)। इस कारण से, सूजे हुए जेल में एक नेटवर्क संरचना होती है, जिसके नोड्स के बीच एक विलायक होता है।

जेल के अंतरालीय स्थान का रेडियल वितरण- प्रयुक्त जेल की मुख्य विशेषता; यह पॉलिमर और विलायक की प्रकृति, ग्रिड आवृत्ति और तापमान पर निर्भर करती है।

जेल क्रोमैटोग्राफी के मामले में पदार्थ पृथक्करण का प्रभाव इस तथ्य के कारण होता है कि मोलर द्रव्यमान (लंबाई) में भिन्न अणु जेल संरचना में अलग-अलग गहराई तक प्रवेश करने में सक्षम होते हैं और अलग-अलग समय तक उसमें बने रहते हैं। इसलिए, निक्षालन के दौरान, बड़े अणु जो जेल कणिकाओं में गहराई तक प्रवेश करने में असमर्थ होते हैं, पहले स्तंभ छोड़ देते हैं, और सबसे छोटे अणु सबसे बाद में बाहर आते हैं। यह ऐसा है मानो अणुओं को जेल के अंतरालीय स्थान से छान लिया गया हो।

क्रोमैटोग्राफी निम्नानुसार की जाती है। जेल के दानों को एक कांच के स्तंभ में रखा जाता है, एक विलायक में फूलने दिया जाता है, और फिर पदार्थों के विश्लेषण किए गए मिश्रण को स्तंभ में डाला जाता है। छोटे अणु कणिकाओं के पूरे आयतन में समान रूप से वितरित होते हैं, जबकि बड़े अणु, अंदर प्रवेश करने में असमर्थ होने के कारण, कणिकाओं (बाहरी आयतन) के आसपास की विलायक परत में ही रहते हैं। इसके बाद, स्तंभ को एक विलायक - एलुएंट से धोया जाता है। जैसा कि पहले ही उल्लेख किया गया है, बड़े अणु छोटे अणुओं की तुलना में अधिक गति से स्तंभ के माध्यम से चलते हैं, जिनकी गति स्थिर चरण के कणिकाओं में गहरे प्रसार द्वारा लगातार धीमी हो जाती है। परिणामस्वरूप, मिश्रण के घटक घटते दाढ़ द्रव्यमान के क्रम में स्तंभ से निकल जाते हैं। स्तंभ से निकलने वाले एलुएंट के नमूने (अंश) विश्लेषण के लिए लिए जाते हैं। यदि एलुएंट का निरंतर स्वचालित विश्लेषण संभव हो तो प्रयोग बहुत सरल हो जाता है।

अनुसंधान के लिए, जेल को चुना जाना चाहिए ताकि विश्लेषण किए गए पदार्थों के लिए इसकी आत्मीयता न्यूनतम हो: इस मामले में, पदार्थ अपने अणुओं के आकार के अनुसार स्तंभ परत के साथ स्वतंत्र रूप से मिश्रण करने में सक्षम होते हैं। जेल के दाने अवश्य होने चाहिए इष्टतम आकार:बहुत छोटा - प्रसार संतुलन की तीव्र स्थापना में योगदान देता है, लेकिन स्तंभ के उच्च हाइड्रोलिक प्रतिरोध का कारण बनता है। बड़े दानों का उपयोग कम हाइड्रोलिक प्रतिरोध देता है, लेकिन प्रसार को रोकता है, जिससे विश्लेषण किए गए पदार्थों का रिलीज समय बढ़ जाता है।

इसके अलावा, कणिकाओं में एक निश्चित यांत्रिक शक्ति होनी चाहिए, अन्यथा स्तंभ में उनके विरूपण से निक्षालन दर में गिरावट आएगी।

जेल क्रोमैटोग्राफी के लिए सबसे अधिक उपयोग किया जाता है सेफैडेक्स(डेक्सट्रान का जेल - एक उच्च आणविक भार पॉलीसेकेराइड), तब बनता है जब कुछ बैक्टीरिया सुक्रोज वातावरण में विकसित होते हैं। आठ प्रकार के सेफडेक्स उपलब्ध हैं, जो उनकी सूजन की डिग्री में भिन्न हैं; यह क्षार और कमजोर एसिड के प्रति प्रतिरोधी है।

आइए सेफैडेक्स पर स्टार्च और ग्लूकोज के मिश्रण को अलग करने के एक विशिष्ट उदाहरण पर विचार करें जी- 25. स्टार्च और ग्लूकोज के 2 सेमी 3 जलीय घोल को 87 ग्राम जेल के साथ एक कॉलम में रखा गया था और मिश्रण को सोडियम क्लोराइड के घोल से मिलाया गया था। निस्पंद अंश एकत्र किए गए और उनमें स्टार्च और ग्लूकोज सामग्री निर्धारित की गई। स्टार्च के अणु व्यावहारिक रूप से जेल कणिकाओं के अंदर प्रवेश नहीं करते थे, इसलिए स्टार्च को पहले 32-44 मिलीलीटर की एलुएंट खपत पर निस्तारित किया गया था, और ग्लूकोज - 66-80 मिलीलीटर की एलुएंट खपत पर दूसरे स्थान पर।

प्राप्त आँकड़ों के आधार पर एक क्रोमैटोग्राम का निर्माण किया गया। ऐसा करने के लिए, अंशों में पदार्थों की सांद्रता को ऑर्डिनेट अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है, और एलुएंट (या अंश संख्या) की मात्रा को एब्सिस्सा अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है। क्रोमैटोग्राम से यह निर्धारित किया गया था पदार्थ प्रतिधारण मात्रा V/- एकत्रित तरल पदार्थ की कुल मात्रा जब तक कि पदार्थ की अधिकतम सांद्रता वाला अंश स्तंभ से बाहर न निकल जाए। एक विशेष कॉलम से, एक दिया गया पदार्थ हमेशा एक ही स्तर पर उत्सर्जित होता है वी,.विचाराधीन मामले में, स्टार्च के लिए प्रतिधारण मात्रा 35 मिली थी, और ग्लूकोज के लिए - 73 मिली।

पदार्थों की अवधारण मात्रा को काफी सटीक रूप से पुन: प्रस्तुत किया जाता है। इसलिए, जेल क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करके, व्युत्क्रम समस्या को हल करना संभव है - अज्ञात यौगिकों के दाढ़ द्रव्यमान को निर्धारित करके उनका निर्धारण करना वी,.ऐसा करने के लिए, कॉलम को पहले कैलिब्रेट किया जाता है: ज्ञात दाढ़ द्रव्यमान के साथ बीएमसी (मानक पॉलिमर) की अवधारण मात्रा निर्धारित की जाती है। इस प्रयोजन के लिए, ज्ञात निश्चित दाढ़ द्रव्यमान वाले प्रोटीन का उपयोग अक्सर हाइड्रोफिलिक जैल को कैलिब्रेट करने के लिए किया जाता है। इसके अलावा, कई गोलाकार प्रोटीनों के लिए, रासायनिक रूप से निर्धारित दाढ़ द्रव्यमान के अलावा, उनके अणुओं का आकार भी ज्ञात होता है। इस प्रकार, ज्ञात प्रोटीन के साथ कैलिब्रेटेड कॉलम का उपयोग करके, अध्ययन किए जा रहे अणुओं की प्रभावी त्रिज्या का अंदाजा भी प्राप्त किया जा सकता है।

प्रतिलिपि

1 रूसी विज्ञान अकादमी, इंस्टीट्यूट ऑफ ऑर्गेनोलेमेंट कंपाउंड्स की स्थापना। ए.एन.नेस्मेयानोवा। पॉलिमर के भौतिकी और रसायन विज्ञान के लिए अनुसंधान और शिक्षा केंद्र, पॉलिमर के जेल पर्मेंट क्रोमैटोग्राफी, विशेष कार्यशाला का उद्देश्य ब्लागोडत्सिख आई.वी. मास्को

2 सामग्री. पॉलिमर क्रोमैटोग्राफी की मूल बातें। पॉलिमर की क्रोमैटोग्राफी के प्रेरक बल और तरीके... क्रोमैटोग्राफिक शिखर की विशेषताएं। सैद्धांतिक प्लेटों की अवधारणा..आकार बहिष्करण (जेल पारगम्यता) क्रोमैटोग्राफी विधि के 3 बुनियादी सिद्धांत। जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी विधि 3 द्वारा पॉलिमर के एमडब्ल्यूडी का विश्लेषण करने पर व्यावहारिक कार्य करना। साहित्य। पॉलिमर क्रोमैटोग्राफी की मूल बातें। पॉलिमर क्रोमैटोग्राफी के प्रेरक बल और मोड। क्रोमैटोग्राफी पदार्थों को दो चरणों के बीच वितरित करके अलग करने की एक विधि है, जिनमें से एक गतिशील और दूसरा स्थिर है। तरल क्रोमैटोग्राफी में मोबाइल चरण की भूमिका झरझरा सामग्री से भरे स्तंभ के साथ कणों के बीच चैनलों में घूमने वाले तरल (एलुएंट) द्वारा निभाई जाती है (आंकड़ा देखें)। चित्र: क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम में एक मैक्रोमोलेक्यूल की गति: डी के - स्थिर चरण के कणों के बीच चैनलों का आकार; डी एन - छिद्र का आकार; आर मैक्रोमोलेक्यूल का आकार है; टी एस मैक्रोमोलेक्यूल द्वारा छिद्र में बिताया गया समय है, टी एम मोबाइल चरण में है। स्थिर चरण तरल से भरे शर्बत के छिद्र हैं। स्तंभ अक्ष के अनुदिश इस चरण की गति की औसत गति शून्य है। विश्लेषक स्तंभ की धुरी के साथ चलता है, मोबाइल चरण के साथ चलता है और स्थिर चरण में प्रवेश करने पर समय-समय पर रुकता है। इस प्रक्रिया को चित्र में दिखाया गया है, जो योजनाबद्ध रूप से कण आकार के अनुरूप डी आकार वाले चैनलों के माध्यम से आर आकार वाले एक मैक्रोमोलेक्यूल के अचानक आंदोलन को दर्शाता है। अणु स्लिट-जैसे छिद्रों में रुकते हैं, जिनका आकार परिमाण के क्रम में मैक्रोमोलेक्यूल्स के आकार से मेल खाता है। क्रमिक पड़ावों के बीच का समय इस प्रकार लिखा जा सकता है:

3 टी टी एस + टी एम + टी के, () जहां टी एस स्थिर चरण में अणु का निवास समय है, टी एम डी मोबाइल चरण में अणु द्वारा बिताया गया समय है (डी - डी अनुप्रस्थ प्रसार गुणांक, टी के समय है मोबाइल चरण से स्थिर चरण और वापस संक्रमण का)। आमतौर पर उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी प्रक्रियाओं (अंग्रेजी साहित्य में एचजीएच प्रदर्शन एलक्यूडी क्रोमैटोग्राफी) में इसके विश्लेषणात्मक संस्करण में, इस बार टी पहले दो की तुलना में बहुत कम है और इसे सूत्र () में छोड़ा जा सकता है। यदि स्तंभ के साथ चलते समय रुकने की संख्या काफी बड़ी है, तो स्तंभ के साथ मैक्रोमोलेक्यूल की गति का कुल समय संतुलन स्थापित करने के विशिष्ट समय की तुलना में काफी बड़ा है। इस मामले में, मोबाइल चरण (या इन चरणों में सांद्रता के अनुपात के बराबर वितरण गुणांक K d) के सापेक्ष स्थिर चरण की एक इकाई मात्रा में एक मैक्रोमोलेक्यूल खोजने की संभावना निर्धारित करने के लिए, संतुलन थर्मोडायनामिक्स के तरीकों का उपयोग किया जा सकता है . अर्थात्, वितरण गुणांक मोबाइल चरण से स्थिर चरण तक मैक्रोमोलेक्यूल के संक्रमण की मुक्त ऊर्जा द्वारा निर्धारित किया जाएगा: टी एस एच जी आरटी केडी एक्सप () आरटी एन खंडों से युक्त श्रृंखला के लिए, के एक्सपी (एन µ), (3) डी जहां µ रासायनिक संभावित खंड में परिवर्तन है। क्रोमैटोग्राफी में वितरण गुणांक एक मौलिक अवधारणा है और इसे निम्नानुसार परिभाषित किया गया है: वीआर वी के डी (4) वीटी वी जहां वी आर वह मात्रा है जिसके साथ एक दिया गया पदार्थ कॉलम छोड़ देता है, वी मोबाइल चरण की मात्रा है, जो उपज द्वारा निर्धारित होती है सबसे बड़े मैक्रोमोलेक्यूल्स में से जो छिद्रों में प्रवेश नहीं करते हैं, वी टी विलायक मोर्चे के साथ निकलने वाले पदार्थों के क्षालन की मात्रा है। (3) से आप तुरंत देख सकते हैं कि, जी के संकेत के आधार पर, मैक्रोमोलेक्यूल्स एक छिद्र में प्रवेश करते समय अलग-अलग व्यवहार करते हैं (चित्र देखें): चित्र.. यदि जी>, तो के डी मैक्रोमोलेक्यूल्स की बढ़ती लंबाई के साथ होता है ( इस स्थिति में निक्षालन की मात्रा भी कम हो जाती है)। यह आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी मोड से मेल खाता है। जी पर< K d экспоненциально растет с ростом ММ и это соответствует адсорбционному режиму хроматографии. Таким образом, оба режима хроматографии могут рассматриваться в рамках единого механизма и, более того, плавно меняя энергию взаимодействия сегмента с поверхностью сорбента за счет состава растворителя или температуры, можно обратимо переходить от одного режима к другому. Экспериментально это было впервые показано в работе Тенникова и др. . Точка (для данной пары полимер - сорбент - это состав растворителя и температура), соответствующая равенству G, при которой происходит компенсация энтропийных потерь и энергетического выигрыша при каждом соударении сегмента макромолекулы со стенкой поры называется критической точкой адсорбции или критическими условиями хроматографии. Как видим, в этих условиях не происходит деления по ММ и это обстоятельство является предпосылкой для использования режима критической хроматографии для исследования разных типов молекулярной неоднородности полимеров, таких как число функциональных групп на концах цепи, состав блоксополимеров, топология 3

4 (शाखित या चक्रीय मैक्रोमोलेक्यूल्स की उपस्थिति)। यह क्रोमैटोग्राफ़िक विधि अपेक्षाकृत नई है और इसके अनुप्रयोग के कुछ सबसे दिलचस्प परिणाम पाए जा सकते हैं, उदाहरण के लिए, कार्यों में [,3,4]। स्थिति जी के अनुरूप क्रोमैटोग्राफी मोड< широко применяется для разделения низкомолекулярных соединений и называется, в зависимости от химической природы функциональных групп на поверхности сорбента, адсорбционной, нормальнофазной, обращеннофазной, ионпарной и т.д. хроматографией. Для полимеров его применение ограничено областью слабых взаимодействий вблизи критических условий и областью олигомерных макромолекул, т.к. с ростом длины цепи мы переходим к практически необратимой адсорбции макромолекулы на колонке. Наиболее важным для полимеров является режим эсклюзионной хроматографии или, как его еще называют, гельпроникающей хроматографии. Этот режим более подробно будет рассмотрен в следующем разделе, а сейчас мы перейдем к описанию некоторых важнейших хроматографических характеристик... Характеристики хроматографического пика. Концепция теоретических тарелок. После прохождения через хроматографическую колонку узкой зоны какого-либо монодисперсного вещества, на выходе мы получаем расширенную зону в виде пика приблизительно гауссова по форме (в случае хорошо упакованной колонки и правильно выбранной скорости хроматографии). Причины расширения пика лежат в различных диффузионных процессах, сопровождающих движение молекул вдоль колонки (см. например, соотношение ()). Наиболее важные характеристики пика - объем элюирования или V R или объем удерживания (относится к центру пика) и дисперсия пика, т.е. второй центральный момент (см.рис.3): σ h V V dv R. (5) Справедливы следующие соотношения между величинами, показанными на рис.3: σ, 43W W b. (6) 4 Рис. 3. Модель гауссова пика. Параметры уширения пика. Часто все эти величины выражаются в единицах времени, тогда говорят о времени удерживания и т.д., однако, в этом случае скорость потока элюента должна быть строго фиксирована. Существует простая феноменологическая теория описания относительного вклада расширения зоны в хроматографическое разделение. Это - теория тарелок. Хроматографическая колонка мысленно делится на ряд последовательных зон, в каждой из которых достигается полное равновесие между растворенным веществом в подвижной и неподвижной фазе. Физическую основу этого подхода составляет скачкообразное движение, описанное в начале первого раздела, и число теоретических тарелок в колонке связано с числом остановок при попадании в неподвижную фазу за время движения данного вещества по колонке. Чем больше это число, тем больше число теоретических тарелок и тем выше эффективность колонки. Число теоретических тарелок определяется следующим образом: 4

5 वीआर एन σ वी 5.54 डब्ल्यू आर वी 6 डब्ल्यू आर बी। (7) चूँकि यह मान निक्षालन मात्रा में परिवर्तन के साथ बदलता है, K d..3 पर छोड़े गए अप्रयुक्त पदार्थ का उपयोग करने के लिए कॉलम की दक्षता को चिह्नित करना सही है। आकार बहिष्करण (जेल पारगम्यता) क्रोमैटोग्राफी विधि के मूल सिद्धांत। आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी (एसजेई एक्सक्लूसन क्रोमैटोग्राफी, एसईसी) या जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी, जेल परमीटन क्रोमैटोग्राफी, जीपीसी) तब लागू की जाती है जब छिद्रों में मैक्रोमोलेक्यूल्स का व्यवहार मुक्त ऊर्जा के एन्ट्रापी घटक द्वारा निर्धारित होता है, और ऊर्जा घटक तुलना में छोटा होता है। . इस मामले में, वितरण गुणांक तेजी से मैक्रोमोलेक्यूल के आकार और छिद्र के आकार के अनुपात पर निर्भर करेगा। स्केलिंग सिद्धांत मैक्रोमोलेक्यूल आर के डी एएक्सपी डी α के आकार के अनुरूप छिद्रों के मामले के लिए निम्नलिखित पैटर्न की भविष्यवाणी करता है, (8) जहां आर एक आदर्श श्रृंखला की विशेषता त्रिज्या है या वॉल्यूमेट्रिक इंटरैक्शन वाली श्रृंखला के लिए 3 आर ए 5 है , डी छिद्र व्यास है, α अपनाए गए छिद्र मॉडल (स्लिट, केशिका, पट्टी) और चेन मॉडल (आदर्श या गैर-आदर्श) के आधार पर 4/3 का घातांक है। इस प्रकार, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी स्थितियों के तहत मैक्रोमोलेक्यूल्स का व्यवहार श्रृंखला के आकार से निर्धारित होता है। एक मैक्रोमोलेक्यूल का आकार उसकी रासायनिक संरचना, श्रृंखला में लिंक की संख्या (या आणविक भार), और टोपोलॉजी द्वारा निर्धारित होता है (उदाहरण के लिए, एक शाखित मैक्रोमोलेक्यूल या मैक्रोसायकल का आकार उसी रसायन के रैखिक मैक्रोमोलेक्यूल की तुलना में कम हो जाता है) संरचना)। इसके अलावा, लचीले मैक्रोमोलेक्यूल्स का आकार बहिष्कृत मात्रा प्रभाव के कारण उपयोग किए गए विलायक पर एक निश्चित सीमा तक निर्भर करता है। हालाँकि, जीपीसी विधि आणविक भार द्वारा पृथक्करण, औसत आणविक भार और आणविक भार वितरण (एमडब्ल्यूडी) निर्धारित करने की एक विधि के रूप में प्रयोगशाला अभ्यास में व्यापक हो गई है। विधि का विकास 5 के दशक के मध्य में शुरू हुआ, जब उच्च-प्रदर्शन जेल पारगम्य क्रोमैटोग्राफी के लिए पहला वाइड-पोर कार्बनिक सॉर्बेंट बनाया गया था। जैसा कि संबंधों (8) से देखा जा सकता है, विधि आणविक द्रव्यमान निर्धारित करने के लिए पूर्ण नहीं है, लेकिन एक ज्ञात एमएम के साथ मानक (अधिमानतः संकीर्ण रूप से बिखरे हुए) नमूनों का उपयोग करके उचित अंशांकन की आवश्यकता होती है जो एमएम के प्रतिधारण मात्रा (या समय) से संबंधित है। चित्र 4 विभिन्न छिद्र आकारों के साथ वाटर्स अर्ध-कठोर कार्बनिक सॉर्बेंट्स (क्रॉस्टीरागेल) पर लॉग वी आर के संदर्भ में पॉलीस्टाइनिन के लिए अंशांकन वक्र दिखाता है। आणविक भार द्वारा किसी भी बहुलक का विश्लेषण करने के लिए, उपयुक्त छिद्र आकार वाले स्तंभ या विभिन्न छिद्रों वाले स्तंभों की एक श्रृंखला का चयन करना आवश्यक है, या विभिन्न छिद्रों वाले शर्बत के मिश्रण वाले स्तंभ का उपयोग करना आवश्यक है (दिए गए उदाहरण में लीनियर स्तंभ) . बेशक, एमएमआर विश्लेषण के लिए जीपीसी पद्धति का उपयोग करने के लिए, पृथक्करण के बहिष्करण तंत्र के कार्यान्वयन के लिए शर्तें प्रदान करना आवश्यक है, जो श्रृंखला के मध्य और अंत दोनों लिंक की बातचीत के प्रभावों से जटिल नहीं है। हम एक जलीय वातावरण में हाइड्रोफिलिक पॉलिमर की क्रोमैटोग्राफी के दौरान गैर-ध्रुवीय विलायक या गैर-ध्रुवीय श्रृंखला के टुकड़ों के रिवर्स-चरण इंटरैक्शन से सोखने की बातचीत के बारे में बात कर रहे हैं। इसके अलावा, आयनित समूहों वाले पानी में घुलनशील पॉलिमर मजबूत इलेक्ट्रोस्टैटिक इंटरैक्शन में सक्षम होते हैं और क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों के विशेष रूप से सावधानीपूर्वक चयन की आवश्यकता होती है। स्थितियों के चयन में एक शर्बत और विलायक (एलुएंट) का चयन शामिल है जो एक विशिष्ट विश्लेषण के लिए रासायनिक संरचना के संदर्भ में उपयुक्त हैं। 5

6 सिफ़ारिशें क्रोमैटोग्राफ़िक उपकरण के निर्माताओं के मैनुअल के साथ-साथ संदर्भ पुस्तकों और मोनोग्राफ (उदाहरण के लिए देखें), 6 वी आर, एमएल चित्र में पाई जा सकती हैं। 4. μstyragel कॉलम के लिए अंशांकन वक्र। यह आंकड़ा सॉर्बेंट के छिद्र आकार को दर्शाने वाले मान के साथ स्तंभों के मालिकाना अंकन को दर्शाता है, जो कि स्टेरिक कारणों से छिद्रों से बाहर रखी गई लम्बी पॉलीस्टाइन श्रृंखला की लंबाई के बराबर है। क्रोमैटोग्राफी कॉलम एक तरल क्रोमैटोग्राफ का हृदय है। क्रोमैटोग्राफ में कई आवश्यक अतिरिक्त उपकरण भी शामिल हैं:) एक एलुएंट आपूर्ति प्रणाली (पंप), जो एक स्थिर प्रवाह प्रदान करता है,) प्रवाह को रोके बिना एक नमूना इंजेक्शन प्रणाली (इंजेक्टर या ऑटोसैंपलर), 3) एक डिटेक्टर - एक उपकरण जो प्रदान करता है स्तंभ से बाहर निकलने पर पदार्थ की सांद्रता के आनुपातिक संकेत का निर्माण (डिटेक्टर विभिन्न प्रकार में आते हैं, जेल पारगम्य क्रोमैटोग्राफी में सबसे लोकप्रिय रेफ्रेक्टोमेट्रिक और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक डिटेक्टर हैं), और 4) व्यक्तिगत आधार पर डेटा संग्रह और प्रसंस्करण प्रणाली कंप्यूटर। आधुनिक क्रोमैटोग्राफ में, क्रोमैटोग्राफ के सभी भागों के संचालन को अक्सर डेटा प्रोसेसिंग सिस्टम के साथ संयुक्त नियंत्रण कार्यक्रम के माध्यम से भी नियंत्रित किया जाता है। आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी F(V) की शर्तों के तहत प्राप्त एक बहुलक का क्रोमैटोग्राम इसके आणविक भार वितरण फ़ंक्शन W() का प्रतिबिंब है। पदार्थ के संरक्षण के नियम के आधार पर: एफ वी डीवी डब्ल्यू डी (9) क्रोमैटोग्राम से एमएमडी फ़ंक्शन तक जाने के लिए, एक अंशांकन फ़ंक्शन वी एफ () होना आवश्यक है, फिर मांगा गया फ़ंक्शन डब्ल्यू एफ (एफ) होगा df () d ये रिश्ते इंस्ट्रुमेंटल ब्रॉडिंग (आईबी) को ध्यान में रखे बिना लिखे गए हैं। एक वास्तविक क्रोमैटोग्राम स्तंभ के साथ चलते समय एमएम द्वारा एक नमूने को अलग करने और ज़ोन धुंधलापन के कारण पॉलिमर होमोलॉग के एक साथ मिश्रण का परिणाम है। इसलिए, संबंध (9) में फ़ंक्शन एफ(डब्ल्यू) को पीयू पर सही किए गए क्रोमैटोग्राम के रूप में समझा जाना चाहिए। यह फ़ंक्शन प्रथम प्रकार के फ्रेडहोम इंटीग्रल समीकरण का समाधान है। पीयू के लिए सुधार के काफी कुछ ज्ञात तरीके हैं। उदाहरण के लिए देखें,. हालाँकि, आधुनिक उच्च-प्रदर्शन क्रोमैटोग्राफ़िक प्रणालियों में, ज्यादातर मामलों में क्रोमैटोग्राम में पीयू का योगदान एमएमपी की तुलना में छोटा है और इसे उपेक्षित किया जा सकता है। सबसे महत्वपूर्ण प्रक्रिया अध्ययन के तहत बहुलक के आणविक द्रव्यमान के अनुसार क्रोमैटोग्राफ का अंशांकन है। यदि अलग-अलग एमएम के साथ उपयुक्त संकीर्ण रूप से बिखरे हुए मानक हैं, तो उनके लिए निक्षालन मात्रा (वीआर या वीई) निर्धारित की जाती है और चित्र 4 में दिखाए गए अंशांकन निर्भरता का निर्माण किया जाता है। आमतौर पर, गेज संबंध () के रूप में मांगा जाता है: n lg C V e () पहली या तीसरी डिग्री के बहुपदों का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है। विषम डिग्री (3.5, 7) के बहुपद एमएम पर ऊपरी और निचली सीमा के साथ अंशांकन वक्रों के विशिष्ट आकार का सबसे सटीक वर्णन करते हैं। पॉलिस्टरीन, पॉलीसोप्रीन, पॉलीमिथाइल मेथैक्रिलेट जैसे पॉलिमर के लिए संकीर्ण रूप से फैले हुए मानकों के सेट मौजूद हैं।

7 पॉलीथीन ऑक्साइड, डेक्सट्रांस और कुछ अन्य। आप सार्वभौमिक अंशांकन विधि का भी उपयोग कर सकते हैं, जिसे पहली बार बेनोइट और सहकर्मियों द्वारा अभ्यास में पेश किया गया था। विधि इस तथ्य पर आधारित है कि मैक्रोमोलेक्यूल्स की हाइड्रोडायनामिक मात्रा बहुलक की आंतरिक चिपचिपाहट और आणविक भार के उत्पाद के समानुपाती होती है और इसे विभिन्न पॉलिमर के लिए एक सार्वभौमिक पैरामीटर के रूप में रेफरेंस वॉल्यूम के फ़ंक्शन के रूप में उपयोग किया जा सकता है। फिर हम किसी मानक के सेट और ज्ञात मार्क-कुह्न-हाउविंक संबंध (3): η के ए का उपयोग करके एक सार्वभौमिक गेज संबंध (), () लॉग η एन बीवी ई, () बनाते हैं। (3) अध्ययन के तहत पॉलिमर के लिए फॉर्म () के संबंध से गेज निर्भरता () की ओर बढ़ने के लिए, संबंधित मार्क-कुह्न-हौविंक संबंध का उपयोग करना पर्याप्त है, जिसके बाद हमें (4) मिलता है: लॉग एन बी वी ई + ए लॉग के। (4) जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी के डेटा के परिणामस्वरूप, कोई औसत की विभिन्न डिग्री के औसत आणविक भार पा सकता है, जो परिभाषा के अनुसार, निम्नलिखित मानों का प्रतिनिधित्व करता है: () एन - संख्या-औसत एमएम , डब्ल्यू () डी डब्ल्यू डी डब्ल्यू जेड डब्ल्यू डी डब्ल्यू डी डब्ल्यू डी डब्ल्यू डी - द्रव्यमान-औसत एमएम, - जेड-औसत एमएम। औसत की विभिन्न डिग्री के एमएम के अनुपात एमएमआर की सांख्यिकीय चौड़ाई की विशेषता बताते हैं। सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला अनुपात w/n है, जिसे बहुविभाजन सूचकांक कहा जाता है। 4. जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करके पॉलिमर के एमडब्ल्यूडी का विश्लेषण करने पर व्यावहारिक कार्य उद्देश्य: तरल क्रोमैटोग्राफ के संचालन से परिचित होना, क्रोमैटोग्राफिक प्रयोग करने की विधि, संकीर्ण रूप से फैले हुए पॉलिमर मानकों का उपयोग करके क्रोमैटोग्राफ को कैलिब्रेट करने की विधि और औसत की गणना करना आणविक भार. उपकरण:) तरल क्रोमैटोग्राफ, जिसमें एक पंप, इंजेक्टर, कॉलम थर्मोस्टेट, एक पॉलिमर सॉर्बेंट वाला कॉलम और एक व्यक्तिगत कंप्यूटर पर आधारित डेटा प्रोसेसिंग सिस्टम शामिल है।) विभिन्न एमएम (पॉलीस्टाइनिन या पॉलीथीन ऑक्साइड) के साथ संकीर्ण रूप से फैले हुए मानकों का एक सेट। 3) अज्ञात आणविक भार के साथ परीक्षण नमूना। प्रक्रिया:) मानकों के मिश्रण का घोल तैयार करना। 7

8) मानकों का एक क्रोमैटोग्राम प्राप्त करना और उनकी अवधारण मात्रा (वी ई) निर्धारित करना। 3) प्रपत्र में अंशांकन निर्भरता का निर्माण ()। 4) अध्ययनाधीन पॉलिमर का घोल तैयार करना। 5) अध्ययनाधीन बहुलक का क्रोमैटोग्राम प्राप्त करना। 6) नमूने के औसत एमएम की गणना। चित्र 5 एक बहुलक नमूने के क्रोमैटोग्राम का एक विशिष्ट उदाहरण दिखाता है, जो औसत एमएम की गणना के लिए तैयार किया गया है, अर्थात्, एक आधार रेखा खींची जाती है जो क्रोमैटोग्राम की शुरुआत और अंत को परिभाषित करती है, और फिर क्रोमैटोग्राम को समय अक्ष के साथ बराबर भागों में विभाजित किया जाता है, तथाकथित स्लाइस. एन डब्ल्यू जेड ए, ए ए ए, ए ए। चित्र। 5. प्रत्येक स्लाइस के लिए, इसका क्षेत्र ए निर्धारित किया जाता है और इसके मध्य के अनुरूप आणविक भार की गणना अंशांकन निर्भरता से की जाती है। फिर औसत आणविक भार की गणना की जाती है: 8

9 3. साहित्य. एम.बी. टेनिकोव, पी.पी. नेफेडोव, एम.ए. लाज़रेवा, एस.या. फ्रेनकेल, झरझरा सॉर्बेंट्स पर मैक्रोमोलेक्यूल्स की तरल क्रोमैटोग्राफी के एकीकृत तंत्र पर, वैसोकोमोलेक। कॉन., ए, 977, टी.9, एन.3, एस.जी.एंटेलिस के साथ, वी.वी.एवरिनोव, ए.आई.कुज़ेव, रिएक्टिव ऑलिगोमर्स, एम: केमिस्ट्री, टी.एम.ज़िमिना, ई.ई. केवर, ई.यू.मेलेनेव्स्काया, वी.एन.ज़गोनिक, बी.जी. बेलेंकी, ब्लॉक कॉपोलिमर, वैसोकोमोलेक की महत्वपूर्ण क्रोमैटोग्राफी में क्रोमैटोग्राफिक "अदृश्यता" की अवधारणा के प्रयोगात्मक सत्यापन पर। कॉन., ए, 99, वी. 33, एन6, आई.वी. ब्लागोडात्सिख के साथ, ए.वी. गोर्शकोव, महत्वपूर्ण क्षेत्र में रिंग मैक्रोमोलेक्यूल्स के सोखने के गुणों का अध्ययन, उच्च आणविक भार। कॉन., ए, 997, वी. 39, एन6, ए.एम. स्कोवर्त्सोव, ए.ए. गोर्बुनोव के साथ, रैखिक और रिंग मैक्रोमोलेक्यूल्स की क्रोमैटोग्राफी का स्केलिंग सिद्धांत, उच्च आणविक भार। कॉन., ए, वॉल्यूम 8, एन 8, बी.जी. बेलेंकी, एल.जेड. विलेंचिक, पॉलिमर क्रोमैटोग्राफी, एम: केमिस्ट्री, डब्ल्यू.डब्ल्यू.याउ, जे.जे. क्रकलैंड, डी.डी.ब्ली, ओडर्न सेज़-एक्सक्लूसन एलक्यूडी क्रोमैटोग्राफी, न्यूयॉर्क: जॉन वेली एंड संस, ई.एल. के साथ। स्टायस्किन, एल.बी. इटिकसन, ई.बी. ब्रूडो। व्यावहारिक उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी। मॉस्को सीएच वू, एड.कॉलम हैंडबुक फॉर सेज़ एक्सक्लूसन क्रोमैटोग्राफी, एन-वाई: एकेडेमैक प्रेस..जेड.ग्रब्स, आर.रेम्प, एच.बेनोर, जे. पॉलिम। एससी., बी, 967, वी.5, पी


ऑर्गेनोलेमेंट कंपाउंड्स इंस्टीट्यूट ऑफ रशियन एकेडमी ऑफ साइंसेज की स्थापना। ए.एन.नेस्मेयानोवा। पॉलिमर के भौतिकी और रसायन विज्ञान के लिए अनुसंधान और शिक्षा केंद्र ब्लागोडात्सिख आई.वी. पॉलिमर की तरल क्रोमैटोग्राफी

1 मैक्रोमोलेक्यूलर यौगिक (लिसेंको ई.ए.) व्याख्यान 7. मैक्रोमोलेक्यूल्स का विखंडन 2 1. विखंडन की अवधारणा। 2. प्रारंभिक अंशांकन. 3. टर्बिडिमेट्रिक अनुमापन विधि। 4. जेल-मर्मज्ञ

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8. प्रश्न 1. क्रोमैटोग्राफी को परिभाषित करें। 2. क्रोमैटोग्राफी की कौन सी विशेषताएँ अन्य पृथक्करण विधियों की तुलना में समान गुणों वाले पदार्थों के बेहतर पृथक्करण को प्राप्त करना संभव बनाती हैं। 3. सूची

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04.07 मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी डिपार्टमेंट ऑफ मॉलिक्यूलर एंड बायोलॉजिकल फिजिक्स फिजिकल रिसर्च मेथड्स लेक्चर 8 क्रोमैटोग्राफी डोलगोप्रुडनी, 6 अप्रैल, 07 योजना। उत्पत्ति का इतिहास

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विश्लेषणात्मक रसायन शास्त्र चौथा सेमेस्टर, व्याख्यान 17. मॉड्यूल 3. क्रोमैटोग्राफी और विश्लेषण के अन्य तरीके। क्रोमैटोग्राफी. विधियों का सिद्धांत और वर्गीकरण। 1. क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण का सिद्धांत। स्टेशनरी और मोबाइल

क्रोमैटोग्राफी की खोज (1903) मिखाइल सेमेनोविच त्सवेट (1872-1919) क्रोमैटोग्राफी के विकास के मुख्य चरण 1903 क्रोमैटोग्राफी की खोज (त्सवेट एम.एस.) 1938 पतली परत या समतल क्रोमैटोग्राफी (इज़मेलोव)

मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी (स्टेट यूनिवर्सिटी) आणविक और जैविक भौतिकी विभाग भौतिक अनुसंधान विधियां व्याख्यान 7 गैस और तरल क्रोमैटोग्राफी। व्यावहारिक

अध्याय 7 गैस-तरल क्रोमैटोग्राफी विश्लेषण की एक विधि के रूप में, क्रोमैटोग्राफी को क्लोरोफिल के घटकों को निर्धारित करने की विशेष समस्या को हल करने के लिए रूसी वनस्पतिशास्त्री एम. एस. त्सवेट द्वारा प्रस्तावित किया गया था। यह विधि सार्वभौमिक निकली।

मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी डिपार्टमेंट ऑफ मॉलिक्यूलर एंड बायोलॉजिकल फिजिक्स फिजिकल रिसर्च मेथड्स लेक्चर 9 गैस क्रोमैटोग्राफी तकनीक और प्रयोगात्मक तरीके डोलगोप्रुडनी, 3 अप्रैल

विषय 5. रियोलॉजी के मूल सिद्धांत। पॉलिमर समाधान की चिपचिपाहट. सैद्धांतिक भाग. चिपचिपा तरल पदार्थ और उच्च आणविक भार पदार्थों (एचएमएस) के समाधान को प्रवाह की प्रकृति के अनुसार न्यूटोनियन और गैर-न्यूटोनियन में विभाजित किया गया है। न्यूटोनियन

बायोफार्मास्युटिकल विश्लेषण के लिए एजिलेंट एडवांसबायो एसईसी आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी कॉलम से लाभ, बेहतर डेटा गुणवत्ता तकनीकी अवलोकन के लिए कई निर्माताओं के कॉलम की तुलना करें

मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी (स्टेट यूनिवर्सिटी) आणविक और जैविक भौतिकी विभाग भौतिक अनुसंधान विधियां व्याख्यान 9 तरल क्रोमैटोग्राफी विधियां और प्रौद्योगिकी

जर्नल ऑफ एनालिटिकल केमिस्ट्री, 5, खंड 6, 7, पृ. 73-78 यूडीसी 543.544 तापमान पर हेनरी स्थिरांक की दी गई निर्भरता के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी की मॉडलिंग। 5 ग्रा. प्रुडकोवस्की ए.जी. भू-रसायन और विश्लेषणात्मक संस्थान

एकत्रीकरण विश्लेषण के लिए एजिलेंट एडवांसबायो एसईसी आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी कॉलम: उपकरण संगतता तकनीकी जानकारी अवलोकन परिचय एजिलेंट एडवांसबायो एसईसी कॉलम एक नया परिवार है

पॉलिमर विश्लेषण के लिए मल्टीडिटेक्टर जेल पेनेट्रेशन क्रोमैटोग्राफी के. स्विर्स्की, एजिलेंट टेक्नोलॉजीज, [ईमेल सुरक्षित]जेल पारगमन क्रोमैटोग्राफी एकमात्र क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है

तैयारी के क्षेत्र में शैक्षणिक अनुशासन "विश्लेषण के क्रोमैटोग्राफिक तरीकों का परिचय" के कार्य कार्यक्रम का सार 04.03.01 प्रशिक्षण प्रोफ़ाइल में रसायन विज्ञान "विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान" 1. अनुशासन में महारत हासिल करने के उद्देश्य

46. ​​क्रोमैटोग्राफ़िक पृथक्करण विधियाँ क्रोमैटोग्राफ़िक विधियाँ बहु-चरण पृथक्करण विधियाँ हैं जिनमें नमूने के घटकों को दो चरणों, स्थिर और मोबाइल के बीच वितरित किया जाता है। स्तब्ध

रूसी शिक्षा और विज्ञान मंत्रालय, राष्ट्रीय अनुसंधान टॉम्स्क राज्य विश्वविद्यालय, रसायन विज्ञान संकाय, अनुशासन का एनोटेटेड कार्य कार्यक्रम, विश्लेषण के क्रोमैटोग्राफ़िक तरीके, प्रशिक्षण की दिशा

वैज्ञानिक और तकनीकी कंपनी सिंटेको तरल क्रोमैटोग्राफी विधि का उपयोग करके कैफीन सामग्री के लिए कॉफी और चाय के मात्रात्मक रासायनिक विश्लेषण की विधि। डेज़रज़िन्स्क 1997 1 यह दस्तावेज़ वितरित किया गया है

व्याख्यान 7 (9.05.05) गैसों में स्थानांतरण प्रक्रियाएं कोई भी थर्मोडायनामिक प्रणाली, जिसका अर्थ है बड़ी संख्या में अणुओं का संग्रह, निरंतर बाहरी परिस्थितियों में थर्मोडायनामिक की स्थिति में आता है

शिक्षा के लिए संघीय एजेंसी उच्च व्यावसायिक शिक्षा के राज्य शैक्षणिक संस्थान "यूराल स्टेट यूनिवर्सिटी के नाम पर रखा गया है। पूर्वाह्न। गोर्की" आईओएनसी "पारिस्थितिकी और प्रकृति प्रबंधन"

उच्च-आणविक यौगिक (लिसेंको ई.ए.) व्याख्यान 5 (-तापमान)। -तापमान और समाधान की आदर्शता.. -तापमान और चरण संतुलन। 3. - मैक्रोमोलेक्यूलर कॉइल्स का तापमान और आकार। .. प्रभाव

व्याख्यान 6 विश्लेषण की क्रोमैटोग्राफ़िक विधियाँ व्याख्यान योजना 1. क्रोमैटोग्राफी की अवधारणाएँ और शर्तें। 2. विश्लेषण की क्रोमैटोग्राफिक विधियों का वर्गीकरण। क्रोमैटोग्राफ़िक उपकरण. 3. क्रोमैटोग्राफी के प्रकार: गैस,

वास्तविक पदार्थ का सिद्धांत. विज्ञान ने वास्तविक गैस के बारे में बड़ी संख्या में सिद्धांत या नियम प्रस्तुत किये हैं। वास्तविक गैसों का सबसे प्रसिद्ध वैन डेर वाल्स नियम, जो व्यवहार के विवरण की सटीकता को बढ़ाता है

बेलारूसी राज्य विश्वविद्यालय के रसायन विज्ञान संकाय, विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान विभाग, विशेष पाठ्यक्रम के 5वें पाठ्यक्रम के छात्रों के लिए विशेष पाठ्यक्रम "क्रोमैटोग्राफ़िक विश्लेषण"

व्याख्यान 7. सतह घटना 1. सतह तनाव 1.1. सतही ऊर्जा. अब तक, हमने विभिन्न मीडिया* के बीच इंटरफ़ेस के अस्तित्व पर ध्यान नहीं दिया है। हालाँकि, इसकी उपस्थिति बहुत हो सकती है

पॉलिमर तरल पदार्थों की विस्कोलोचशीलता। बहुलक तरल पदार्थों के मूल गुण। अत्यधिक आपस में जुड़ी हुई श्रृंखलाओं वाले पॉलिमर तरल पदार्थों में पॉलिमर पिघल, केंद्रित समाधान और अर्ध-पतला शामिल हैं

मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी (स्टेट यूनिवर्सिटी)) आणविक भौतिकी विभाग भौतिक अनुसंधान विधियां व्याख्यान 9 क्रोमैटोग्राफी। परिचय डोलगोप्रुडनी, 9 अक्टूबर, 0 योजना।

विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान यूडीसी 543.544 बायोगैस विश्लेषण में अवशोषण क्रोमैटोग्राफी 1999 एम.वी. निकोलेव रिसर्च इंस्टीट्यूट ऑफ केमिस्ट्री, यूएनएन। एन.आई. लोबचेव्स्की एल.पी. प्रोखोरोव निज़नी नोवगोरोड वातन स्टेशन कार्यप्रणाली विकसित हुई

आधुनिक प्रारंभिक फ़्लैश क्रोमैटोग्राफी भाग 2* ए. अबोलिन, पीएच.डी., "गलाखिम" [ईमेल सुरक्षित]पी.-एफ. इकारस, इंटरचिम (फ्रांस) हम तैयारी के आधुनिक तरीकों पर सामग्री प्रकाशित करना जारी रखते हैं

जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी चयन गाइड के लिए कॉलम और मानकों का चयन करने के लिए एक त्वरित गाइड परिचय जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी (जीपीसी) आणविक भार वितरण का आकलन करने की एक तकनीक है।

रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय जनरल फार्माकोपियल माउंटिंग क्रोमैटोग्राफी OFS.1.2.1.2.0001.15 कला के बजाय। एसपी XI, अंक 1 क्रोमैटोग्राफी आधारित पदार्थों के मिश्रण को अलग करने की एक विधि है

एजिलेंट जेल परमीशन क्रोमैटोग्राफी सॉफ्टवेयर तेज, आसान पॉलिमर विश्लेषण के लिए एक एकल, व्यापक समाधान मुख्य विशेषताएं परिचय एजिलेंट टेक्नोलॉजीज

2.2.29. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) दो अमिश्रणीय पदार्थों के बीच पदार्थों के अंतर वितरण पर आधारित एक पृथक्करण विधि है।

यारोस्लाव राज्य शैक्षणिक विश्वविद्यालय के नाम पर रखा गया। के. डी. उशिंस्की सामान्य भौतिकी विभाग आणविक भौतिकी प्रयोगशाला प्रयोगशाला कार्य 5 गैल्टन बोर्ड पर सांख्यिकीय पैटर्न का अध्ययन

व्याख्यान 3. चरण सीमाओं की मुक्त सतह ऊर्जा, सतही बल। सतही तनाव आइए एक ऐसी प्रणाली पर विचार करें जिसमें एक तरल और वाष्प संतुलन में है। प्रणाली में घनत्व वितरण

विश्लेषण की 2 विधियाँ: 1. रासायनिक विधियाँ। रासायनिक संतुलन और विश्लेषण में इसका उपयोग। एसिड बेस संतुलन। अम्ल और क्षार की शक्ति, उनके परिवर्तन के पैटर्न। हैममेट फ़ंक्शन. गणना

व्याख्यान 7 शाखित श्रृंखला अभिक्रियाएँ। शाखित श्रृंखला प्रतिक्रियाओं में महत्वपूर्ण घटनाएँ। ई.-के. पृ. 38-383, 389-39. रेडिकल गठन की दर के लिए एक सरल अभिव्यक्ति: d r f(p) g(p) (1)

व्याख्यान 6 लुक्यानोव आई.वी. गैसों में परिवहन घटनाएँ। सामग्री: 1. अणुओं का माध्य मुक्त पथ। 2. माध्य मुक्त पथ द्वारा अणुओं का वितरण। 3. प्रसार. 4. गैस की चिपचिपाहट (आंतरिक घर्षण)।

फ़ेडरल स्टेट बजटरी इंस्टीट्यूशन ऑफ़ साइंस "किरोव रिसर्च इंस्टीट्यूट ऑफ़ हेमेटोलॉजी एंड ब्लड ट्रांसफ़्यूज़न ऑफ़ द फ़ेडरल मेडिकल बायोलॉजिकल एजेंसी" 3.3.2। मेडिकल इम्यूनोबायोलॉजिकल

1. व्याख्यात्मक नोट 1.1. छात्रों के लिए आवश्यकताएँ छात्र के पास निम्नलिखित प्रारंभिक दक्षताएँ होनी चाहिए: गणितीय और प्राकृतिक विज्ञान के बुनियादी सिद्धांत; स्वतंत्र कौशल रखते हैं

1 व्याख्यान 10 प्रसार संपर्क में दो प्रणालियाँ। रासायनिक क्षमता. चरण संतुलन की स्थिति. संक्रमण की गर्मी. क्लैपेरॉन-क्लॉसियस फॉर्मूला। प्रसार में दो प्रणालियाँ संतुलन अवस्था से संपर्क करती हैं

1. दक्षताओं की सूची जो उनके गठन के चरणों (स्तरों) को दर्शाती है। पीसी-1: फोरेंसिक परीक्षा और अपराध विज्ञान की सैद्धांतिक, पद्धतिगत, प्रक्रियात्मक और संगठनात्मक नींव के ज्ञान का उपयोग करने की क्षमता

विषय। सतही घटनाओं का भौतिक-रसायन विज्ञान। सोखना। सतही घटनाएँ विषम प्रणालियों में प्रकट होती हैं, अर्थात्। सिस्टम, जिनके घटकों के बीच एक इंटरफ़ेस होता है। सतही घटनाएँ

टॉम्स्क राज्य विश्वविद्यालय के भौतिकी संकाय द्वारा स्टोक्स विधि का उपयोग करके तरल चिपचिपापन गुणांक का अध्ययन किया जा रहा है, प्रयोगशाला कार्य के लिए दिशानिर्देश टॉम्स्क 2014 की समीक्षा की गई और अनुमोदित किया गया

अत्यधिक लोचदार बहुलक जाल। पॉलिमर जाल. पॉलिमर नेटवर्क में एक विशाल त्रि-आयामी मैक्रोमोलेक्यूल बनाने के लिए एक साथ क्रॉस-लिंक की गई लंबी पॉलिमर श्रृंखलाएं होती हैं। सभी पॉलिमर

गैस क्रोमैटोग्राफी 1 पदार्थों के लिए आवश्यकताएँ 1. अस्थिरता 2. थर्मल स्थिरता (पदार्थ को बिना अपघटन के वाष्पित होना चाहिए) 3. जड़ता गैस क्रोमैटोग्राफ आरेख 1 2 3 4 5 1. वाहक गैस के साथ सिलेंडर

पाठ्यक्रम शैक्षिक मानक OSVO 1-31 05 01 2013 और शैक्षिक संस्थान G 31 153/स्कूल के पाठ्यक्रम पर आधारित है। 2013 कंपाइलर: वी.ए. विनार्स्की, एसोसिएट प्रोफेसर, रासायनिक विज्ञान के उम्मीदवार, एसोसिएट प्रोफेसर अनुशंसित

रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय जनरल फार्माकोपियल माउंटिंग क्रोमैटोग्राफी कागज OFS.1.2.1.2.0002.15 पर कला के बजाय। राज्य निधि XI, अंक 1 फ़िल्टर शीट पर होने वाली क्रोमैटोग्राफ़िक प्रक्रिया

रूसी संघ के शिक्षा और विज्ञान मंत्रालय, शिक्षा के लिए संघीय एजेंसी, उच्च व्यावसायिक शिक्षा के राज्य शैक्षणिक संस्थान "यूएफए स्टेट ऑयल"।

जेल पर्मेंट/सेक्शन क्रोमैटोग्राफी सामग्री के लिए एजिलेंट पॉलिमर मानक जीपीसी के लिए पॉलिमर मानक... 3 इनफिनिटीलैब ईजीवायल...5 इनफिनिटीलैब ईजीकैल...8 पॉलीस्टाइरीन मानक...9 मानक

ग्रुप ए कंपनी बी आई ओ सी एच आई एम ए के जेड ए के आर वाई बायो 1 1 9 8 9 9, रूस, मॉस्को, लेनिन दूरभाष/फैक्स (0 9 5 ) 939-59-67, दूरभाष। 939- विश्लेषणात्मक किट मॉस्को के उपयोग पर आई एन एस टी आर यू सी टी आई ओ एन

आयन क्रोमैटोग्राफी सिद्धांत: शिखर मापदंडों का वर्णन करने के लिए एक सार्वभौमिक दृष्टिकोण 1998। ए.जी. प्रुडकोव्स्की, ए.एम. डोलगोनोसोव इंस्टीट्यूट ऑफ जियोकेमिस्ट्री एंड एनालिटिकल केमिस्ट्री का नाम वी.आई. वर्नाडस्की रूसी विज्ञान अकादमी 117975 के नाम पर रखा गया है।

मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी (स्टेट यूनिवर्सिटी) आणविक और जैविक भौतिकी विभाग भौतिक अनुसंधान विधियां क्रोमैटोग्राफी में व्याख्यान 8 डिटेक्टर तरल क्रोमैटोग्राफी

रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय जनरल फार्माकोपियल लेख वैद्युतकणसंचलन OFS.1.2.1.0021.15 कला के बजाय। राज्य निधि XI, अंक 1 वैद्युतकणसंचलन आवेशित कणों की क्षमता पर आधारित एक विश्लेषण विधि है

1 उच्च-आणविक यौगिक (लिसेंको ई.ए.) व्याख्यान 10. अनाकार पॉलिमर का थर्मोमैकेनिकल विश्लेषण। 2 1. भौतिक निकायों के यांत्रिक विश्लेषण की बुनियादी अवधारणाएँ। 2. अनाकार पॉलिमर के थर्मोमैकेनिकल वक्र

5 समाधानों में भौतिक संतुलन 5 मिश्रण के घटकों के आंशिक दाढ़ मान आदर्श गैसों के मिश्रण के थर्मोडायनामिक गुणों पर विचार करने से संबंध Ф = Σ Ф, (5) n होता है जहां Ф कोई व्यापक है

6.. मॉस्को इंस्टीट्यूट ऑफ फिजिक्स एंड टेक्नोलॉजी (स्टेट यूनिवर्सिटी) आणविक भौतिकी विभाग भौतिक अनुसंधान विधियां व्याख्यान गैस क्रोमैटोग्राफी। तकनीकी कार्यान्वयन तरल क्रोमैटोग्राफी

उच्च-आणविक यौगिक (लिसेंको ई.ए.) व्याख्यान 4. बहुलक समाधानों में चरण संतुलन। विघटन गतिकी। एकाग्रता व्यवस्थाएँ। एक बहुलक समाधान की स्थिति का समीकरण। . चरण संतुलन

प्रयोगशाला कार्य। गैसोलीन अंश में संरचना सी 8 के एरेन्स की सामग्री का निर्धारण, आणविक स्तर पर तेल और संघनन की हाइड्रोकार्बन (एचसी) संरचना का ज्ञान पेट्रोकेमिस्ट्री के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।

आदर्श पॉलिमर श्रृंखला. आदर्श पॉलिमर श्रृंखला. एक आदर्श श्रृंखला एक मॉडल श्रृंखला होती है जिसमें तथाकथित थोक इंटरैक्शन की उपेक्षा की जाती है, अर्थात। श्रृंखला के साथ दूर स्थित कड़ियों की अंतःक्रिया।

प्रयोगशाला कार्य 1.17 यादृच्छिक चर के सामान्य वितरण के नियम का अध्ययन एम.वी. कोज़िंटसेवा कार्य का उद्देश्य: एक यांत्रिक मॉडल (गैल्टन बोर्ड) पर यादृच्छिक चर के वितरण का अध्ययन करना। व्यायाम:

बेलारूसी राज्य विश्वविद्यालय को रसायन विज्ञान संकाय के डीन डी.वी. द्वारा अनुमोदित किया गया। स्विरिडोव 2011 पंजीकरण यूडी-/आर पॉलिमर के समाधान विशेषता में पाठ्यक्रम 1-31 05 01 रसायन विज्ञान (क्षेत्रों में)